| 描述 |
Endoxifen hydrochloride 是 Tamoxifen 的活性代谢物,是有效的雌激素受体 (estrogen receptor) 拮抗剂。
|
| 相关类别 |
|
| 靶点 |
Estrogen receptor[1]
|
| 体外研究 |
Endoxifen阻断ER-α转录活性并抑制雌激素诱导的乳腺癌细胞增殖。这些研究表明,Endoxifen浓度在10到1000 nM之间会增强ERα蛋白的降解。较低浓度的Endoxifen(≤1nM)不影响ERα蛋白水平[1]。
|
| 体内研究 |
GLAST :: Cre(ERT); ROSA26loxP/loxP小鼠在心室内注射5μL5mMEndoxifen,注射4μLAdeno-Cre病毒[109噬斑形成单位(pfu)]的小鼠作为阳性对照。在ICV注射后7-10天,处死小鼠并解剖SVZ以分离并衍生干细胞和祖细胞。然后将这些干/祖细胞在允许培养基中培养以形成神经球并测定重组。在我们未经传代的制剂中发现来自注射恩多昔芬的GLAST :: CreERT2; ROSA26loxP/loxP小鼠,其中1.9％的神经球显示重组,而Adeno-Cre重组的ROSA26loxP/loxP小鼠中神经球的释放率较高[2]。 ]。
|
| 细胞实验 |
将MCF7和Ishikawa细胞在10％三炭剥离的含血清培养基中培养3天。然后将细胞以每孔2,000个细胞的密度接种在96孔组织培养板中，并如48小时所述进行处理。使用CellTiter-Glo发光细胞活力试剂盒[1]在第一次处理后8天进行细胞增殖测定。
|
| 动物实验 |
使用小鼠[2] GLAST :: CreERT2小鼠。注射他莫昔芬作为活性代谢物4-羟基三苯氧胺（4-OH-TAM）或4-羟基-N-去甲基三苯氧胺（Endoxifen）。将4-OH-TAM以1mM浓度溶解在2％乙醇/ PBS中，并将5μL注射到心室中。之前没有使用Endoxifen来诱导ERT2系统。盐酸恩多昔芬水合物在100％DMSO中具有超过10mg / mL（25mM）的推荐溶解度，对应于5μL体积中的最大浓度25mM或125nmol的剂量。在该浓度下，一小部分小鼠出现暗示神经毒性的神经系统体征。随后，分别使用溶解在10％，20％，40％，50％和100％DMSO中的2.5,5,10,12.5和25mM的浓度，对应于12.5,25,50,62.5和125nmol的药物剂量。为了测试DMSO毒性，向三只小鼠的组注射5μLPBS，50％DMSO的PBS溶液或100％DMSO的PBS溶液。注射后9天小鼠被淘汰，并且对冠状切片的脑进行染色以切割胱天蛋白酶3，GFAP和Iba1。
|
| 参考文献 |
[1]. Wu X, et al. The tamoxifen metabolite, Endoxifen, is a potent antiestrogen that targets estrogen receptor alpha fordegradation in breast cancer cells. Cancer Res. 2009 Mar 1;69(5):1722-7. [2]. Benedykcinska A, et al.Generation of brain tumours in mice by Cre-mediated recombination of neural progenitors in situ with the tamoxifen metabolite Endoxifen. Dis Model Mech. 2016 Feb;9(2):211-20.
|
