| 描述 |
Ozanimod 是一种有效的选择性 S1P1 和 S1P5 受体激动剂,在[35S]-GTPγS 结合实验中,EC50 分别为 410±160 pM 和 11±4.3 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
EC50: 410±160 pM (S1P1 receptor), 11±4.3 nM (S1P5 receptor)[1]
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| 体外研究 |
Ozanimod(RPC1063)是一种有效的鞘氨醇-1-磷酸受体-1(S1P1)和受体-5(S1P5)激动剂。无论是测量cAMP产生(160±60pM)抑制还是[35S]-GTPγS结合(410±160pM),EC50值对于S1P1受体都是亚纳摩尔的。 S1P5受体的EC50值是否测量抑制[35S]-GTPγS结合(11±4.3 nM)。 Ozanimod表现出对S1P5受体的激动剂活性[11±4.3nM和83％Emax(最大刺激的百分比)]。为了确定Ozanimod是否诱导持续的S1P1受体内化,将S1P1受体-HEK293T细胞与10μM环己酰亚胺存在下的不同剂量的Ozanimod一起温育,以防止新的S1P1受体蛋白的翻译。处理1小时后分析细胞,或者在1小时处理后彻底洗涤以除去Ozanimod并与1μM环己酰亚胺再孵育24小时。处理1小时后,Ozanimod诱导S1P1受体细胞表面表达的显着丧失,其程度和效力与用FTY720-P处理的细胞相似。在处理1小时和24小时洗脱期后,Ozanimod表现出对细胞表面S1P1受体重新表达的剂量依赖性作用,在10nM以上浓度下细胞表面受体表达几乎完全和持续丧失[1]。
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| 体内研究 |
Ozanimod(RPC1063)对S1P1和S1P5受体具有特异性,诱导S1P1受体内化并诱导体内循环B和CCR7 + T淋巴细胞的可逆性减少。 Ozanimod显示出高的口服生物利用度和分布容量,以及支持每日一次给药的循环半衰期。口服奥扎莫德减少了所有三种自身免疫疾病模型中的炎症和疾病参数[1]。
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| 细胞实验 |
表达S1P1受体的转染的HEK293T细胞的代表性直方图与媒介物对照或1μMRPC1063一起温育。将HEK293T细胞与递增剂量的Ozanimod（0.01 nM，0.1 nM，1 nM，10 nM，100 nM，1μM和10μM）一起孵育1小时，或1小时，然后进行大量洗涤以去除化合物，然后进行24小时h监测恢复期和细胞表面受体表达[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[1]雌性C57BL / 6小鼠（总共60只，10周龄）在第0天用完全弗氏佐剂的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）35-55肽免疫，并在2小时和24小时后给予百日咳毒素。在第一次出现EAE临床症状（跛行尾巴）时，将小鼠随机分入治疗组（每组n = 10），每天一次给予试验化合物，持续14天。在免疫后9天之前发生疾病的小鼠没有登记，因为这些小鼠经常发展对治疗无反应的暴发性疾病。试验化合物为0.2和0.6mg / kg Ozanimod，3mg / kg FTY720或载体（5％DMSO，5％Tween-20,90％0.1N HCl）。每天监测动物的体重和临床症状并评分。在研究结束时，通过吸入在10-20kPa下用氧气鼓泡的异氟烷麻醉小鼠，通过心脏穿刺抽血以放血并用兽医血液分析仪分析。
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| 参考文献 |
[1]. Scott FL, et al. Ozanimod (RPC1063) is a potent sphingosine-1-phosphate receptor-1 (S1P1 ) and receptor-5 (S1P5 ) agonist with autoimmune disease-modifying activity. Br J Pharmacol. 2016 Jun;173(11):1778-92.
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