ML335

ML335 是 TREK-1 和 TREK-2 的选择性激活剂。

信号通路 >> 跨膜转运 >> 钾通道

研究领域 >> 神经疾病

TREK-1, TREK-2

非洲爪蟾卵母细胞双电极电压钳测量显示ML335和ML402激活K2P2.1和K2P10.1但不激活K2P4.1(14.3±2.7μM,K2P2.1-ML335; 13.7±7.0μM,K2P2.1-ML402; 5.2±0.5μM,K2P10.1-ML335;和5.9±1.6μM,K2P10.1-ML402)。将K2P2.1和K2P4.1之间的Lys271等价物交换导致ML335和M402活化的明显表型逆转。 ML335和ML402在HEK293细胞中激活K2P2.1,类似于它们在非洲爪蟾卵母细胞中的作用(ML335和ML402分别为5.2±0.8μM和5.9±1.6μM(n≥3))[1]。

小鼠K2P2.1，人K2P4.1和突变体由先前描述的HEK293T细胞（ATTC）中的pIRES2-EGFP载体表达。用LipofectAMINE 2000转染70％汇合的细胞（在35mm直径的孔中）6小时，并铺在涂有Matrigel的盖玻片上。在转染后24小时，通过全细胞膜片钳实验测量ML335，ML402和花生四烯酸对0mV的K2P2.1电流的影响。使用pCLAMP9和Axopatch 200B放大器进行采集和分析。移液器电阻范围为1至1.5MΩ。移液管溶液含有以下物质：145mM KCl，3mM MgCl 2,5mM EGTA和20mM HEPES（pH 7.2，含KOH）。浴溶液含有以下物质：145mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl 2,3mM MgCl 2和20mM HEPES（pH 7.4，用NaOH）。从-80 mV的保持电位开始，从-100到+50 mV的1 s斜坡引发K2P2.1电流。在稳定基础电流后，ML335和ML402以每小时200mL灌注直至稳定达到增强[1]。

[1]. Lolicato M, et al. K2P2.1 (TREK-1)-activator complexes reveal a cryptic selectivity filter binding site. Nature. 2017 Jul 20;547(7663):364-368.

尼日利亚菌素钠 | 4-氟-A-(4-氟苯基)-A-苯基-苯甲酰胺 | N-[4-[[1-[2-(6-甲基-2-吡啶基)乙基]-4-哌啶基]羰基]苯基]甲磺酰胺二盐酸盐 | 4-氨基吡啶 | 人参皂苷Rg3 | 1-[(2-氯苯基)二苯甲基]-1H-吡唑 | 多非利特 | 5-(4-苯氧基丁氧基)补骨脂素(PAP-1) | 米诺地尔 | 氟芬那酸 | 马来酸氟吡汀 | 1-(2-羟基-5-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3h)-酮 | Endoxifen Z-异构体盐酸盐 | 3-肟-6,7-二氯-1H-吲哚-2,3-二酮 | 奎宁； 无水奎宁； 金鸡纳碱； 金鸡纳霜