LY3023414

LY3023414 有效且选择性地抑制 PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ,DNA-PK,和 mTOR ,IC50 分别为 6.07 nM,77.6 nM,38 nM,23.8 nM,4.24 nM,和 165 nM。在低纳摩尔浓度下,LY3023414 有效抑制 mTORC1/2。

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研究领域 >> 癌症

PI3Kα:6.07 nM (IC50)

PI3Kβ:77.6 nM (IC50)

PI3Kδ:38 nM (IC50)

PI3Kγ:23.8 nM (IC50)

mTOR:165 nM (IC50)

mTORC1

mTORC2

DNA-PK:4.24 nM (IC50)

在基于细胞的测定中,在PTEN缺陷型U87 MG胶质母细胞瘤细胞系中评估PI3K和mTOR的LY3023414抑制。 LY3023414抑制PI3K下游T308位的Akt磷酸化,IC50为106nM。类似地,LY3023414通过mTORC2抑制位置S473处的Akt磷酸化(IC50 = 94.2nM)以及mTORC1激酶靶标p70S6K(位置T389; IC50 = 10.6nM)和4E-BP1(位置T37/46; IC50 = 187nM)的磷酸化。 )。 p70S6K在pS240/244位置(IC50 = 19.1nM)的S6RP的下游磷酸化也被抑制,表明LY3023414沿整个PI3K/Akt/mTOR途径的靶抑制。在具有活化的PI3K/Akt/mTOR途径的其他细胞系中观察到PI3K和mTOR磷酸化靶标的类似IC50浓度。在剂量反应研究中,在LY3023414处理2至3次细胞倍增后,在来自培养物中不同肿瘤类型的32种人癌细胞系中评估LY3023414抑制癌细胞增殖的能力。 LY3023414在一半的细胞系中表现出有效的单一药剂活性和低于122 nM的IC50值[1]。

在几种表现出激活PI3K/Akt/mTOR途径的突变或缺失的异种移植模型中研究了LY3023414抑制肿瘤生长的能力。每天两次口服3,6或10mg/kg的LY3023414治疗28天导致PTEN缺失的U87 MG异种移植模型中肿瘤生长的剂量反应性抑制。该处理在表现出PTEN截短(786-O),激活PI3Kα突变(NCI-H1975)和转基因Eμ-myc突变体PI3Kα驱动的白血病模型的模型中产生类似的TGI。值得注意的是,LY3023414的总日剂量似乎导致等效的抗肿瘤活性：每天一次12 mg/kg和每天两次6 mg/kg在U87 MG中产生相似的ΔT/ C值(分别为42％和38％)[ 1]。

使用KiNativ平台和一组102种激酶作为来自Cerep的纯化酶，针对一组192个激酶在PC-3细胞裂解物中评估LY3023414的选择性和抑制潜力。这两个激酶组共同覆盖了大约266种独特的激酶。用三种浓度的LY3023414测试这些激酶以测量抑制并计算近似IC 50值。 LY3023414对PI3Kα的IC50是使用5nM重组人PI3Kα，0.01mM ATP和1.76mM Triton X 100 / 0.04mM PIP2 / 0.2mM PS混合胶束作为脂质底物在闪烁亲近测定（SPA）中用新霉素测量的。连珠。使用具有0.04mM ATP和0.27mM Triton X 100 / 0.05mM PIP2 / 0.04mM PA混合胶束作为脂质底物的混合胶束SPA形式测量LY3023414对PI3Kβ的IC 50。测量PI3Kδ和PI3Kγ以及DNA-PK的IC50。测量mTOR的IC50 [1]。

CellTiter-Glo发光细胞活力测定系统用于测量LY3023414在2次细胞倍增后对铺在塑料上的细胞的抗增殖作用，或在软琼脂中孵育2周，其中收集标准细胞系和人源患者衍生的肿瘤异种移植物传代在裸鼠。对于软琼脂测定，RKO和SK-OV-3细胞; MOLT-4和L-363细胞;使用DLD-1，HCT-116，HCT-15和NCI-H460细胞。这些标准细胞系由STR基因分型并与现有STR参考基因型匹配。使用Affymetrix全基因组人SNP阵列6.0以及全外显子组测序来表征Oncotest PDX模型（包括最初在NCI衍生的MX1型）。遗传同一性分析证实所有PDX模型均来自独立的患者样本。进行组合研究，其中LY3023414与其他治疗剂以固定的浓度比例混合，所述浓度对应于每种单一药剂的IC50当量。计算50％抑制的组合指数（CI50）[1]。

小鼠[1]异种移植肿瘤皮下植入无胸腺裸，CD-1裸鼠和NMRI无胸腺裸鼠。 B6.Cg-Tg（IghMyc）22Bri / J小鼠和C57BL / 6NTac小鼠用于类似于Akt1 E17K癌症模型的Eμ-myc转基因原位突变体PI3KαE545K驱动的白血病模型中。 LY3023414在含有0.25％聚山梨醇酯80和0.05％Dow-Corning消泡剂1510-US的蒸馏水中的1％HEC中配制，并通过口服管饲法（最终体积0.2mL）以指定的剂量和时间表给药。在肿瘤体积达到150至200mm 3后进行功效和体内靶抑制研究。在向携带肿瘤的小鼠施用单剂量的LY3023414后的不同时间点进行靶抑制研究。收集肿瘤，快速冷冻，在MSD缓冲液中裂解，然后使用MSD-ELISA多重方法分析。

[1]. Wei L, et al. Genomic profiling is predictive of response to cisplatin treatment but not to PI3K inhibition in bladder cancer patient-derived xenografts. Oncotarget. 2016 Nov 22;7(47):76374-76389.

[2]. Smith MC, et al. Characterization of LY3023414, a Novel PI3K/mTOR Dual Inhibitor Eliciting Transient Target Modulation to Impede Tumor Growth. Mol Cancer Ther. 2016 Oct;15(10):2344-2356

雷帕霉素 | 3-甲基腺嘌呤 | LY294002 | 渥曼青霉素 | Alpelisib (BYL719) | Torin 1 | 5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺 | IPI549 | MHY1485 | 沙帕色替 | AZD8055 | 2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺 | 艾代拉里斯 | Dactolisib (BEZ235) | 槲皮素