| 描述 |
CPI-1205 是一种有效的选择性组蛋白甲基转移酶 EZH2 抑制剂 (生化实验中,IC50 为 2 nM。细胞实验中,EC50 为 32 nM)。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 2 nM (EZH2)[1]
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| 体外研究 |
当在体外hERG结合测定中在45nM至100μM的浓度范围内测试时,CPI-1205显示IC50为21.3μM。当针对zeste同系物1(EZH1)(一种与EZH2高度相关的甲基转移酶)的增强子进行测试时,CPI-1205表现出适度的选择性(EZH1 IC50为52±11nM)。 CPI-1205实现远高于其各自细胞效力的未结合暴露;然而,只有CPI-1205的未结合暴露仍然远高于细胞EC50直至4小时[1]。
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| 体内研究 |
在携带肿瘤的雌性CB-17 SCID小鼠中,CPI-1205以160mg/kg口服给药,每日两次(po BID)25天。用CPI-1205处理携带肿瘤的CB-17 SCID小鼠后,在2周内观察到肿瘤消退。到第25天结束时,记录显着的肿瘤生长抑制(相对于媒介物> 97％TGI)。当以160mg/kg BID给药时,CPI-1205在Karpas-422异种移植模型中表现出强大的抗肿瘤效果。 CPI-1205显示出优异的口服生物利用度。 CPI-1205的中度清除率为2.16 L/h/kg(肝脏血流量为40％),半衰期为~1.6 h,分布容积相似(1.4 L/kg),生物利用度优异(100％F)[ 1]。
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| 激酶实验 |
PRC2（wt或Y641N突变体），生物素化核小体，H3K27me3激活肽和CPI-1205（在DMSO中）在50mM Tris，pH8.5,5mM MgCl 2,1mM DTT，70μMBrij-35和0.1mg / ml中孵育。 mL BSA 30分钟。通过添加[3H] -SAM至5nM PRC2,200nM核小体（浓度表达为H3），活化肽（3.6μM）和200nM [3H] -SAM的总体积为25μL的最终条件来引发反应。在384井格瑞纳板块。对于CPI-1205，分析测定是单点或十点剂量响应，最终总DMSO为0.8或1.6％（v / v）。通常，测定进行60分钟，底物周转率<35％。通过在50mM Tris，pH8.5中加入20μL2mMSAH和200mM EDTA淬灭反应测定。将反应转移至链霉抗生物素蛋白包被的FlashPlates，孵育2小时，吸出，洗涤，并在TopCount上读数[1]。
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| 细胞实验 |
将10种不同剂量的每种测试化合物（以一系列3倍稀释）置于一式两份的384孔组织培养物处理的平板中。将培养中生长的HeLa细胞用胰蛋白酶消化并计数。将细胞在10％DMEM中稀释至67,000个细胞/ mL，并使用Biotek MicroFloTM Select Dispenser将15μL（1,000个细胞）接种到每个孔中。将板在37℃/ 5％CO 2下孵育72小时。其中一个复制板用于AlphaLISA处理，另一个用于生存。通过向具有培养基的细胞的每个孔中加入15μLCellTiter Glo来测定细胞活力。将平板在平板振荡器上以低速在室温下孵育15-20分钟。然后使用EnVision-Alpha Reader [1]读取平板。
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| 动物实验 |
大鼠[1] CPI-1205在符合GLP的毒性研究中口服给予Sprague-Dawley大鼠和比格犬4周，然后恢复4周。 CPI-1205通过口服强饲法以100,300和600mg / kg的单日剂量（QD）给予大鼠28天，并且每日两次剂量（BID）为50,150和500mg / kg，28天。狗的日子。一般而言，CPI-1205在28天的GLP毒理学研究中具有良好的耐受性，并且任何发现在恢复期内都是可逆的。
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| 参考文献 |
[1]. Vaswani RG, et al. Identification of (R)-N-((4-Methoxy-6-methyl-2-oxo-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-2-methyl-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroethyl)piperidin-4-yl)ethyl)-1H-indole-3-carboxamide (CPI-1205), a Potent and Selective Inhibitor of Histone Methyltransferase EZH2, Suitable for Phase I Clinical Trials for B-Cell Lymphomas. J Med Chem. 2016 Nov 10;59(21):9928-9941.
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