| 描述 |
A-485 是 p300/CBP 的强效选择性催化抑制剂,对 p300 和 CBP 的 IC50 值分别为 9.8 nM 和 2.6 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 9.8 nM (p300), 2.6 nM (CBP)[1]
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| 体外研究 |
用A-485处理前列腺腺癌PC-3细胞3小时导致H3K27Ac的剂量依赖性降低,半数最大有效浓度(EC50)为73nM。用A-485治疗不会改变p300或CBP蛋白水平。在血液肿瘤中观察到最广泛的敏感性,其中A-485在大多数多发性骨髓瘤细胞系中以及在急性髓性白血病细胞系和非霍奇金淋巴瘤细胞系中显示出强效活性。在所有五种前列腺癌细胞系中,A-485诱导H3K27Ac的相当减少。用A-485处理雄激素依赖性LnCaP-FGC细胞系减弱了二氢睾酮(DHT)刺激的前列腺特异性抗原(PSA)表达[1]。
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| 体内研究 |
在SCID雄性小鼠中建立肿瘤后,每天两次腹膜内注射A-485在给药21天后诱导54％的肿瘤生长抑制(与载体对照相比,P <0.005)。此外,在荷瘤动物中,用A-485给药7天后,在给药后3小时诱导MYC和AR依赖性基因SLC45A3的mRNA水平降低,并且(对于MYC)蛋白质降低。水平,表明A-485在体内抑制p300介导的转录活性。然而,在第7天给药后16小时,与3小时相比,血浆和肿瘤中的A-485药物水平降低。 A-485诱导适度的9％体重减轻,并且在完成A-485给药方案后动物迅速恢复[1]。
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| 细胞实验 |
将细胞系接种在96孔或384孔板中并使其粘附24小时。然后用A-485处理细胞3天，4天或5天。实验一式三份进行，并且根据制造商的推荐使用Cell Viability Assay测定活细胞的分数。对于胸苷掺入测定，将细胞用A-485处理1,2,3或4天。在该时间点之前二十四小时，加入氚标记的胸苷并将细胞再孵育24小时。然后在滤板上分离基因组DNA [1]。
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| 动物实验 |
在该研究中使用LuCap-77 CR前列腺PDX模型。将供体肿瘤解离并在第0天以0.2mL的体积将其作为布里（1：2）注射到16周龄雄性CB-17 SCID小鼠的右胁腹中。肿瘤在接种后第26天大小匹配，平均肿瘤体积为211±3（SEM）mm 3，从第28天开始给药。使用基于肿瘤体积的Studylog软件将小鼠随机分成治疗组。在SCID小鼠中建立LuCap-77 CR异种移植肿瘤，并且给动物服用A-485，持续7天。最终剂量后3小时，收获肿瘤并在干冰上快速冷冻[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Lasko LM, et al. Discovery of a selective catalytic p300/CBP inhibitor that targets lineage-specific tumours. Nature. 2017 Oct 5;550(7674):128-132.
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