描述 |
TP-0903是具有高效性和选择性的Axl受体酪氨酸激酶抑制剂,IC50值为27 nM。
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相关类别 |
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靶点 |
IC50: 27nM (Axl)[1]
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体外研究 |
TP-0903对AXL显示出强效活性,IC50为0.027μM。 TP-0903在细胞活力测定中显示出极其有效的活性,对胰腺癌细胞系PSN-1的IC50为6nM。评估TP-0903阻断GAS6介导的胰腺癌细胞中AXL活化的能力。 PSN-1细胞血清饥饿,然后在各种浓度的TP-0903存在下用GAS6刺激[1]。
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激酶实验 |
将TP-0903在激酶反应缓冲液中稀释,并与Axl激酶短暂孵育。通过加入ATP和荧光素标记的poly-GT底物引发反应。测定中各种组分的浓度(10μL反应体积)是:1%DMSO,93ng / mL Axl激酶,20μLATP和200nM荧光素poly-GT底物。在室温下孵育60分钟,通过在含EDTA的缓冲液中加入10μL铽标记的抗磷酸酪氨酸PY20抗体来终止酶反应。加入反应后EDTA和抗体的最终浓度分别为10mM和2nM。在室温下孵育1小时后,在酶标仪上用激发320nm和495和520nm的双发射测量荧光[1]。
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细胞实验 |
对于细胞增殖测定,将每孔含有1000个细胞的45μL接种到适当培养基中的固体白色384孔板中。第二天,将TP-0903在无血清生长培养基中稀释至10x所需浓度,并向每个孔中加入5μL。将合并的化合物和细胞孵育96小时。孵育后,向每个孔中加入40μLATP-Lite溶液,在室温下再孵育10分钟,并在酶标仪上测量发光[1]。
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参考文献 |
[1]. Mollard A, et al. Design, Synthesis and Biological Evaluation of a Series of Novel Axl Kinase Inhibitors. ACS Med Chem Lett. 2011 Dec 8;2(12):907-912.
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