| 描述 |
Pimasertib (AS703026) 是一种高效,具有选择性,ATP 非竞争性的 MEK1/2 别构抑制剂,主要用于癌症研究。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
MEK1
MEK2
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| 体外研究 |
Pimasertib(5,0.5和0.1μM)特异性阻断MM细胞中的ERK1/2活化,单独培养或与BMSC一起培养。 Pimasertib以剂量依赖性方式抑制MM细胞系的生长,IC50范围为0.005至2μM。 Pimasertib对INA-6,U266,H929细胞的IC50分别为10nM,5nM,200nM。 Pimasertib诱导细胞凋亡并调节细胞周期特征。 Pimasertib靶向BM微环境中的MM细胞[1]。 Pimasertib(10μmol/ L)抑制西妥昔单抗抗性D-MUT细胞中的ERK通路,增殖和转化[2]。 Pimasertib与PLX4032组合显着诱导RPMI-7951细胞的凋亡,而单独使用的每种药物则不会。 Pimasertib与小干扰RNA介导的BRAF下调协同作用,产生与PLX4032和Pimasertib联合治疗相似的结果[3]。
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| 体内研究 |
Pimasertib(15,30 mg/kg)显着抑制CB17 SCID小鼠人H929 MM异种移植模型中肿瘤的生长[1]。 Pimasertib(10 mg/kg,po)抑制由K-ras突变引起的西妥昔单抗抗性肿瘤的肿瘤生长[2]。
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| 细胞实验 |
通过[3H]胸苷掺入和通过测量MTT染料吸光度来评估研究化合物对MM细胞生长和存活的抑制作用。将细胞（对于MM细胞系为104 /孔，一式三份，对于患者MM细胞为2-5×105 /孔）在96孔板中培养3天（MM细胞系）或5天（患者MM细胞）。对于[3H]胸苷掺入测定，将细胞用0.5μCi（0.0185MBq）/孔[3H]胸苷脉冲6小时（细胞系），收获到玻璃纤维滤器上，并在β-闪烁计数器中计数。由于患者MM细胞的低DNA合成，它们用2μCi/孔[3H]胸苷脉冲并在培养的最后36小时测量。
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| 动物实验 |
在100μLRPMI-1640培养基中用H929（4×106）细胞皮下接种CB17严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠。小鼠在细胞注射后约3周产生可触知的肿瘤（约130mm 3）并随机接受每日两次口服Pimasertib（15或30mg / kg）或单独的对照载体。使用卡尺每隔一天在2个维度上测量肿瘤大小，并计算肿瘤体积。当它们的肿瘤体积达到2立方厘米时，当它们垂死或显示麻痹或其生活质量发生重大损害时，对动物实施安乐死。使用GraphPad Prism版本4.03 for Windows绘制用对照载体对比Pimasertib处理的小鼠中的肿瘤形成变化。使用特异性单克隆（m）Abs对肿瘤进行免疫印迹和免疫化学分析。使用Leica DM LB研究显微镜检查图像，使用Leica IM50图像管理器捕获，并使用Adobe Photoshop软件7.0版处理。
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| 参考文献 |
[1]. Kim K, et al. Blockade of the MEK/ERK signalling cascade by AS703026, a novel selective MEK1/2 inhibitor, induces pleiotropic anti-myeloma activity in vitro and in vivo. Br J Haematol, 2010, 149(4), 537-549. [2]. Yoon J, et al. MEK1/2 inhibitors AS703026 and AZD6244 may be potential therapies for KRAS mutated colorectal cancer that is resistant to EGFR monoclonal antibody therapy. Cancer Res, 2011, 71(2), 445-453. [3]. Park SJ, et al. The MEK1/2 inhibitor AS703026 circumvents resistance to the BRAF inhibitor PLX4032 in human malignant melanoma cells. Am J Med Sci. 2013 Dec;346(6):494-8.
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