| 中文名 |
肝素
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| 英文名 |
Heparin
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| 英文别名 |
clarin
thrombophob
HED heparin
liquaemin
Enoxaparine
pularin
Depo heparin
MFCD00081689
EINECS 232-681-7
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| 描述 |
Heparin是硫酸粘多糖,是注射抗凝剂,是负电荷密度最高的生物分子。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Human Endogenous Metabolite
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| 体外研究 |
肝素是一种有效的抗凝血药物,基于其加速抗凝血酶抑制血液凝固级联中丝氨酸蛋白酶的速率的能力。肝素和结构上相关的硫酸乙酰肝素是复杂的线性聚合物,其由具有可变序列的不同长度的链的混合物组成。肝素与含有高正电荷密度的互补结合位点的肽最紧密地相互作用。肝素和硫酸乙酰肝素主要表现出线性螺旋二级结构,其中磺基和羧基以限定的间隔显示并沿着多糖主链以确定的方向显示。肝素类似于DNA,因为它们都是高电荷的线性聚合物,其表现为聚电解质。肝素被认为主要通过其与AT III的相互作用起抗凝作用,通过增强AT-III介导的凝血因子(包括凝血酶和因子Xa)的抑制。肝素以三元复合物与AT III和凝血酶结合,使凝血酶抑制的双分子速率恒定增加2000倍。肝素主要位于与免疫应答密切相关的组织肥大细胞颗粒中。肝素与FGF-2和FGFR-1的多种接触稳定FGF-FGFR结合。肝素还与邻近的FGF-FGFR复合物的FGFR-1接触,因此似乎促进FGFR二聚化[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Capila I, et al. Heparin-protein interactions. Angew Chem Int Ed Engl. 2002 Feb 1;41(3):391-412.
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| 密度 |
2.18 g/cm3 |
| 沸点 |
644.9ºC at 760mmHg |
| 分子式 |
C26H42N2O37S5 |
| 分子量 |
1134.93000 |
| 闪点 |
343.8ºC |
| 精确质量 |
1134.01000 |
| PSA |
652.39000 |
| 外观性状 |
白色或类白色结晶粉末 |
| 折射率 |
1.711 |
| 水溶解性 |
H2O: 50 mg/mL, clear, faintly yellow |
CHEMICAL IDENTIFICATION
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RTECS NUMBER :
-
MI0700000
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CHEMICAL NAME :
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Heparin
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CAS REGISTRY NUMBER :
-
9005-49-6
-
LAST UPDATED :
-
199706
HEALTH HAZARD DATA
ACUTE TOXICITY DATA
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TYPE OF TEST :
-
TDLo - Lowest published toxic dose
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Subcutaneous
-
SPECIES OBSERVED :
-
Human - man
-
DOSE/DURATION :
-
1857 units/kg/13D-I
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TOXIC EFFECTS :
-
Cardiac - other changes Nutritional and Gross Metabolic - changes in potassium
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TYPE OF TEST :
-
TDLo - Lowest published toxic dose
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Subcutaneous
-
SPECIES OBSERVED :
-
Human - woman
-
DOSE/DURATION :
-
1000 units/kg/5D-I
-
TOXIC EFFECTS :
-
Nutritional and Gross Metabolic - changes in potassium
-
TYPE OF TEST :
-
TDLo - Lowest published toxic dose
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Intravenous
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SPECIES OBSERVED :
-
Human - man
-
DOSE/DURATION :
-
3536 units/kg/13D-I
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TOXIC EFFECTS :
-
Nutritional and Gross Metabolic - changes in potassium
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TYPE OF TEST :
-
LD50 - Lethal dose, 50 percent kill
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ROUTE OF EXPOSURE :
-
Oral
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SPECIES OBSERVED :
-
Rodent - rat
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DOSE/DURATION :
-
1950 mg/kg
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TOXIC EFFECTS :
-
Details of toxic effects not reported other than lethal dose value
-
TYPE OF TEST :
-
LDLo - Lowest published lethal dose
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Intraperitoneal
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SPECIES OBSERVED :
-
Rodent - rat
-
DOSE/DURATION :
-
420 mg/kg
-
TOXIC EFFECTS :
-
Details of toxic effects not reported other than lethal dose value
-
TYPE OF TEST :
-
LD50 - Lethal dose, 50 percent kill
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Intraperitoneal
-
SPECIES OBSERVED :
-
Rodent - mouse
-
DOSE/DURATION :
-
1900 mg/kg
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TOXIC EFFECTS :
-
Behavioral - altered sleep time (including change in righting reflex) Behavioral - somnolence (general depressed activity) Behavioral - muscle weakness
-
TYPE OF TEST :
-
LD50 - Lethal dose, 50 percent kill
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Subcutaneous
-
SPECIES OBSERVED :
-
Rodent - mouse
-
DOSE/DURATION :
-
500 mg/kg
-
TOXIC EFFECTS :
-
Behavioral - somnolence (general depressed activity) Behavioral - muscle weakness
-
TYPE OF TEST :
-
LD50 - Lethal dose, 50 percent kill
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Intravenous
-
SPECIES OBSERVED :
-
Rodent - mouse
-
DOSE/DURATION :
-
500 mg/kg
-
TOXIC EFFECTS :
-
Behavioral - somnolence (general depressed activity)
-
TYPE OF TEST :
-
TDLo - Lowest published toxic dose
-
ROUTE OF EXPOSURE :
-
Intravenous
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DOSE :
-
2857 units/kg
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SEX/DURATION :
-
male 5 day(s) pre-mating
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TOXIC EFFECTS :
-
Reproductive - Paternal Effects - other effects on male
MUTATION DATA
-
TYPE OF TEST :
-
Unscheduled DNA synthesis
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TEST SYSTEM :
-
Rodent - guinea pig Bone marrow
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DOSE/DURATION :
-
5 mg/L
-
REFERENCE :
-
FOBLAN Folia Biologica (Prague). (Academic Press Inc. Ltd., 24-28 Oval Rd., London NW1 7DX, UK) V.1- 1955- Volume(issue)/page/year: 16,196,1970 *** REVIEWS *** TOXICOLOGY REVIEW AEMBAP Advances in Experimental Medicine and Biology. (Plenum Pub. Corp., 233 Spring St., New York, NY 10013) V.1- 1967- Volume(issue)/page/year: 52,375,1975 TOXICOLOGY REVIEW JPMSAE Journal of Pharmaceutical Sciences. (American Pharmaceutical Assoc., 2215 Constitution Ave., NW, Washington, DC 20037) V.50- 1961- Volume(issue)/page/year: 62,517,1973 *** NIOSH STANDARDS DEVELOPMENT AND SURVEILLANCE DATA *** NIOSH OCCUPATIONAL EXPOSURE SURVEY DATA : NOHS - National Occupational Hazard Survey (1974) NOHS Hazard Code - 84488 No. of Facilities: 374 (estimated) No. of Industries: 3 No. of Occupations: 8 No. of Employees: 4525 (estimated) NOES - National Occupational Exposure Survey (1983) NOES Hazard Code - 84488 No. of Facilities: 430 (estimated) No. of Industries: 4 No. of Occupations: 14 No. of Employees: 27273 (estimated) No. of Female Employees: 23149 (estimated)
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| 安全声明 (欧洲) |
24/25
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| WGK德国 |
2 |
| RTECS号 |
MI0850000 |
| 海关编码 |
3001901000 |
【方法一】
方法一、酶解-树脂法
酶解 取100kg新鲜肠黏膜(总固体5%-7%)，加苯酚200ml (0.2%)，如气温低时可不加。在搅拌下加入绞碎胰0.5-1kg(0.5%-1%)，用 300-400g/L(30%-40%)NaOH溶液调节pH8.5-9，升温至40-45℃，保温2-3h。pH8，再加5kg粗食盐(5%)升温至90℃左右，用6mol/L HCl调节pH 6.5左右，停止搅拌，保温20min，以布袋过滤，得酶解滤液。
肠黏膜[胰浆，NaOH]→[pH8.5-9, 40-45℃, 保温2-3h]肠黏膜液[NaCl, 6mol/L HCl]→[pH8; 90℃, pH6.5]滤液
吸附、洗涤、洗脱 取上述滤液冷至50℃以下，用6mol/L NaOH调节pH7，加入5kgD-254强碱性阴离子交换树脂，搅拌5h左右，交换完毕，弃去液体，用自来水漂洗树脂至水清，用与树脂等体积的2mol/L NaCl，搅拌洗涤15min，弃去洗涤液，再加2倍树脂体积的1.2mol/L NaCl洗涤2次。用约树脂体积一半的5mol/L NaCl洗脱1h，收集洗脱液，然后用约树脂体积的1/3的3mol/L NaCl洗脱2次，合并洗脱液。
滤液[D-254树脂, NaOH]→[pH7, 5h]吸附物[NaCl]→[2mol/L→1.2mol/L, →5mol/L, →3mol/L]洗脱液
沉淀、脱水、干燥 将洗脱液用滤纸浆助滤，过滤1次，澄清滤液以体积计加入用活性炭处理过的0.9倍的95%乙醇，冷处沉淀8-12h。虹吸上清液弃去，按100kg黏膜加300ml的比例向沉淀中补加蒸馏水，再加入4倍量95%乙醇，冷处放置6h，收集沉淀，用无水乙醇脱水1次，丙酮脱水2次，置P2O5干燥器中真空干燥，得肝素钠粗品。
洗脱液[95%乙醇]→[8-12h]沉淀物[无水乙醇；丙酮]→[P2O5]肝素钠粗品
脱色、沉淀、干燥 用20g/L(2%)氯化钠溶液配成100 g/L(10%)的肝素钠溶液，以40g/L(4%)高锰酸钾溶液进行氧化脱色，每亿单位估计加入0.65mol高锰酸钾。先将药液调至pH8，预热80℃，在搅拌下加入高锰酸钾，保温2.5h，以滑石粉作助滤剂，过滤，收集滤液。将滤液调节pH6.4，用0.9倍的95%乙醇置于冷处理沉淀6h以上，收集沉淀，溶于10 g/L(1%)氯化钠溶液中，用量按肝素钠粗品质量收率60%-70%计，配成50 g/L(5%)肝素钠溶液，再用4倍量的95%乙醇冷处放置6h以上，收集沉淀物，用无水乙醇、丙酮脱水，乙醚洗涤1次，置P2O5干燥器中干燥，得肝素钠精品。肠黏膜换算成总固体7%计，收率20000U/kg，最高效价141.6U/mg。
肝素钠粗品[20g/L NaCl]→肝素钠溶液[KMnO4]→[pH8, 80℃, 2.5h]滤液[95%乙醇]→[pH6.4, 6h]沉淀物[无水乙醇；丙酮；乙醚]→肝素钠精品
注射剂的制备 取肝素钠成品溶于一定量注射用水中，封口，灭菌，即得。
肝素钠精品[注射用水]→注射剂
方法二、盐解-树脂法
提取 取新鲜猪肠黏膜投入反应锅中，按30g/L(3%)加入氯化钠，NaOH调节pH9，逐步升温至50-55℃，保温2h，继续升温至95℃，维持10min，冷却50℃以下，用30目双层纱布过滤，收集滤液。
猪肠粘膜[NaCl; NaOH]→[pH9; 50-55℃]滤液
吸附、洗涤、洗脱、沉淀 取冷却50℃以下的滤液，加入714型(强碱性)Cl-型树脂(新树脂用量为2%)，搅拌8h后静置过夜。次日虹吸除去上层液，收集树脂，用水冲洗至洗液澄清，滤干，用2倍量1.4mol/L氯化钠搅拌2h，滤干；再用1倍量1.4mol/L氯化钠搅拌2h，滤干；继续改用2倍树脂量的3mol/L氯化钠搅拌洗脱8h，滤干；再用1倍量3mol/L氯化钠搅拌洗脱2h，滤干，合并滤液，加入等量95%乙醇沉淀，过夜，虹吸除去上清液，收集沉淀。丙酮脱水干燥，得粗品。
滤液[714型树脂]→吸附物[NaCl]→[1.4mol/L, 3mol/L]洗脱液[95%乙醇，丙酮]→粗品
溶解、脱色、沉淀、干燥 粗品溶于15倍10 g/L(1%)氯化钠溶液中，加入6mol/L盐酸调pH1.5左右，过滤至清，随即用5mol/L氢氧化钠调节pH11，按3%加入过氧化氢(浓度为30%)25℃放置。开始不断调整pH至11，第2天再按1%加入过氧化氢，调整pH11，继续放置，共48h。过滤，用6mol/L盐酸调节pH6.5，加入等量的95%乙醇沉淀。过夜。次日虹吸除去上清液，沉淀用丙酮洗涤脱水，干燥，即得肝素钠精品。总收率20000U/kg肠黏膜(按肠黏膜的固体量为5%-7%计算)。
粗品[1%NaCl, 6mol/L HCL]→[pH1.5]滤液[NaOH, H2O2]→[pH11, 25℃, 48h]滤液[6mol/L HCl, 95%乙醇]→[pH6.5, 24h]沉淀[丙酮]→肝素钠精品
方法三、CTAB*提取法(*十六烷基三甲基溴化胺为长链季铵盐)
提取、络合 按猪肠黏膜液(V)：Na2SO4(m)：硫酸铝(m)：CTAB(V)=1：0.15：0.04：0.001的配料比投料。取新鲜猪小肠黏膜投入反应罐中，搅拌下加入硫酸钠，溶解后，用碱液调节pH11-11.5，升温50℃，保温搅拌2h，再加硫酸铝，溶解后，用氢氧化钠调节pH7.5-8，升温至95℃，保温10min，趁热过滤，待滤液冷却至60℃以下时，缓缓加入CTAB和硅藻土，搅拌吸附1h，静置过夜，滤饼用40℃热蒸馏水洗至无色，抽干即得络合物。
猪肠黏膜液[Na2SO4，碱液， Al2(SO4)3]→[pH11-11.5, 50℃, 2h; pH7.5-8, 95℃, 10min]提取液[CTAB， 硅藻土]→[60℃以下，1h]滤饼[蒸馏水]→[40℃]络合物
解离、沉淀 取络合物溶于适量氯化钠溶液中，以冰醋酸调pH4，升温60℃，保温30min，静置过
【方法二】
肝素最初从肝脏中提出，现多由猪、羊、牛等动物的肠粘膜中提取，从肺脏，肝脏出可提取。取新鲜肠粘膜投入反应锅内，按3%加入氯化钠，用40%的氢氧化钠调节pH至9.5。在半小时内逐步升温至60-65℃，继续保温搅拌2h，然后升温至95℃，维持10min，冷却至50℃以下过滤。将强碱性季铵盐阴离子树脂加入滤液中，搅拌吸附8小时，静置过液。次日，虹吸去上层液，树脂用水冲洗至上清液澄清，滤干，用2倍量1.4M氯化钠搅拌2小时，滤干，树脂再用不着倍量1.4M氯化钠洗涤1次。然后，树脂用3M氯化钠洗脱两次，滤干，将滤液合并，加入等量的95%乙醇沉淀过液，收集沉淀，用丙酮脱水干燥，得粗制品。粗制品溶于1%氯化钠中，用盐酸调节pHGCF 1.7-1.8，过滤。用5N氢氧化钠调节pH至11，加30%浓度过氧化氢脱色，过滤。滤液用盐酸调节pH至6，加入等量95%乙醇沉淀。沉啶物用丙酮洗涤，干燥，即为肝素。
