<生产厂家价格>

1-[3-[3-(4-氯丙基)丙氧基]丙基]-哌啶盐酸盐

用途

Pitolisant盐酸盐(BF2.649;Ciproxidine)是新型的人重组H3受体选择性反向激动剂,Ki为0.16 nM。

名称

[ CAS 号 ]:
903576-44-3

[ 中文名 ]:
1-[3-[3-(4-氯丙基)丙氧基]丙基]-哌啶盐酸盐

[ 英文名 ]:
Pitolisant hydrochloride

[英文别名 ]:

Pitolisant hydrochloride
Ciproxidine
Pitolisant (hydrochloride)

生物活性

[ 描述 ]:

Pitolisant盐酸盐(BF2.649;Ciproxidine)是新型的人重组H3受体选择性反向激动剂,Ki为0.16 nM。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> G 蛋白偶联受体/G 蛋白 >> 组胺受体

信号通路 >> 免疫及炎症 >> 组胺受体

研究领域 >> 神经疾病

[ 靶点 ]

Ki: 0.16 nM (H3 receptor)[1] EC50: 1.5 nM (H3 receptor)[1]

[体外研究]

在鸟苷5'-O-(3- [35S]硫代)三磷酸与这种受体结合的刺激下,Pitolisant(BF2.649)表现为竞争性拮抗剂,Ki值为0.16 nM,并且作为EC50的反向激动剂值为1.5 nM,内源活性比环丙二酚高约50％。 Pitolisant取代了小鼠脑皮质膜中[125I]碘丙酸的结合,IC50值为26.4±4.5 nM。考虑到放射性配体的Kd值(161±9 pM),推断的Pitolisant的Ki值为14±1 nM。 Pitolisant取代稳定表达人H3受体的大鼠神经胶质瘤C6细胞膜的[125I]碘丙氧基结合,IC50值为4.2±0.2nM。考虑到放射性配体的Kd值(50±4 pM),推断的Pitolisant的Ki值为2.7±0.5 nM。 Pitolisant逐渐逆转此响应,希尔系数接近于1,IC50值为330±68 nM,导致Ki值为17±4 nM。 Pitolisant引起基底特异性[35S]GTPγS与膜结合的剂量依赖性降低,最大效应相当于基础特异性结合的75±1％,EC50值为1.5±0.1nM [1]。

[体内研究]

在单剂量奥氮平(2 mg/kg体重)前30分钟给予Pitolisantat单剂量10 mg/kg也会显着影响FST的不动时间。与在FST中对照组中测定的时间相比,随后在小鼠中施用上述药物序列在统计学上显着增加了不动的持续时间。它也降低了运动活动。相反,在两次给药15次后给予亚慢性治疗的结果(Pitolisant 10mg/kg体重,并且在奥氮平2mg/kg体重30分钟后,以及4小时奥氮平2mg/kg体重后再次)显示给药Pitolisant接着是Olanzapine,均衡了小鼠的运动活动;与对照组的运动水平相比,只有Pitolisant给药。更重要的是,这种药物组合显着降低了不动时间,达到了小鼠强迫游泳试验中对照组的水平[单因素方差分析; F(3,20)= 4.226,P = 0.0181] [2]。在调理阶段给予Pitolisant(10 mg/kg)的大鼠在成对质地上保持502±94 s,这个值与对照组没有统计学差异,表明Pitolisant不支持位置偏好[3]。

[激酶实验]

[35S]进行GTPγS结合测定。将稳定表达人H3受体（~400fmol / mg蛋白）的CHO-K1细胞在冰冷的缓冲液（50mM Tris / HCl，pH7.4）中匀浆。将匀浆物离心两次（20,000g，在4℃下10分钟），并将最终的沉淀重悬于50体积的缓冲液中。将膜（550μg蛋白质）用腺苷脱氨酶（1U / mL）预处理，并在25℃下与0.1nM [35S]GTPγS孵育60分钟，并在最终体积为1mL的测定缓冲液中测试待测药物（50mM Tris / HCl，50mM NaCl，5mM MgCl2,10μMGDP，和0.02％牛血清白蛋白，pH7.4）。使用10μM非放射性GTPγS测定非特异性结合。通过GF / B玻璃纤维过滤器在真空下快速过滤来终止孵育。用冰冷的水洗涤后，通过液体闪烁光谱法计算捕集在过滤器上的放射性。类似的测定用于评估竞争性拮抗作用。简而言之，稳定表达人H3受体（~600 fmol / mg蛋白）的HEK-293细胞膜（10μg蛋白）在Pitolisant存在于缓冲液（50 mM Tris / HCl，pH 7.4,10 mM）中预孵育在96孔微量培养板中，在室温（19-20℃）温和搅拌下，MgCl 2,100mM NaCl和10μMGDP），然后加入0.1nM [35S]GTPγS（终体积200μL）。使用10μM浓度的非放射性GTPγS测定非特异性结合。 30分钟后，通过在Multiscreen MAFCOB50微孔板上真空快速过滤来终止一式三份的温育。通过液体闪烁光谱法计算捕集在过滤器上的放射性[1]。

[动物实验]

小鼠[2]在该研究中使用重20-22g的成年雌性Albino Swiss小鼠。将奥氮平或Pitolisant悬浮于1％吐温80中。在急性实验前30分钟腹膜内（ip）施用化合物或媒介物。在Pitolisant + Olanzapine组中，在Olanzapine前15分钟给予Pitolisant。亚临床治疗在上午9点左右进行（对照组为0.2 mL Tween，Pitolisant组为10 mg / kg bw，Olanzapine组为奥氮平-2 mg / kg bw，10％/ kg bw和Olanzapine） 15分钟-2 mg / kg体重计至Pitolisant + Olanzapine组）和下午1:00左右（Olanzapine组和Pitolisant + Olanzapine组）。大鼠[3]雄性Wistar大鼠（220-300g）接受载体（甲基纤维素1％，po），Pitolisant（10mg / kg，po）或D-苯丙胺（2.5mg / kg，在盐水中ip）。 90分钟后，它们被断头处死，并将伏隔核解剖出来，称重，在液氮中冷冻并储存在-80℃。将组织在1mL 0.4N高氯酸/2.7mM EDTA溶液中匀浆。离心（8000rpm，20分钟，4℃）后，通过与电化学检测偶联的HPLC分析上清液。测定多巴胺（DA），二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）的组织浓度，并计算相应的比率（DOPAC / DA，HVA / DA）。

[参考文献]

[1]. Ligneau X, et al. BF2.649 [1-{3-[3-(4-Chlorophenyl)propoxy]propyl}piperidine, hydrochloride], a nonimidazole inverse agonist/antagonist at the human histamine H3 receptor: Preclinical pharmacology. J Pharmacol Exp Ther. 2007 Jan;320(1):365-75.

[2]. Dudek M, et al. H3 histamine receptor antagonist pitolisant reverses some subchronic disturbances induced by olanzapine in mice. Metab Brain Dis. 2016 Oct;31(5):1023-9.

[3]. Uguen M, et al. Preclinical evaluation of the abuse potential of Pitolisant, a histamine H₃ receptor inverse agonist/antagonist compared with Modafinil. Br J Pharmacol. 2013 Jun;169(3):632-44.

[相关活性小分子]