氨来呫诺的作用和生物活性

发布时间:2018-10-30 14:16:55 编辑作者:活性达人

氨来呫诺图片

图片:氨来呫诺结构式

氨来呫诺是一种抗口疮性溃疡药物。氨来呫诺抑制肥大细胞,中性粒细胞和单核细胞中炎症介质(包括白三烯和组胺)的合成和释放。氨来呫诺还可作为白三烯D4拮抗剂和磷酸二酯酶抑制剂。氨来呫诺减少溃疡愈合的时间以及与溃疡相关的疼痛。

一、氨来呫诺的生物活性详解:
1)体外活性
氨来呫诺可增加3T3-L1脂肪细胞中Ser172上TBK1的磷酸化,并阻断聚胞苷:聚胞苷酸(polyI:C)刺激的干扰素反应因子-3(IRF3)的磷酸化,这是IKKε和TBK1的假定底物[1]。氨来呫诺在体外环境中有效抑制肥大细胞,嗜碱性粒细胞和中性粒细胞释放组胺和白三烯,可能通过增加炎症细胞内细胞内环AMP含量,降低膜内稳定作用或抑制钙内流[2]。

在原代骨髓衍生的巨噬细胞(BMM)中,氨来呫诺抑制破骨细胞形成和骨吸收。在分子水平上,氨来呫诺抑制RANKL诱导的核因子-κB(NF-κB),丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs),c-Fos和NFATc1的激活。氨来呫诺降低破骨细胞特异性基因的表达,包括TRAP,MMP9,组织蛋白酶K和NFATc1[3]。

2)体内活性
氨来呫诺(100mg/kg,p.o。)预防和逆转饮食诱导或遗传性肥胖,并在肥胖小鼠中产生可逆的体重减轻。氨来呫诺还导致这些小鼠的脂肪组织质量显着降低,并且循环脂联素增加。氨来呫诺(25mg/kg)显着改善已建立DIO的小鼠的胰岛素敏感性,治疗4周后,氨来呫诺可显着改善葡萄糖[1]。在第一次施用糊剂之前和之后的氨来呫诺已被证明可以抑制其立即和评价。分类量表也是迟发型超敏反应[2]。氨来呫诺(20mg/kg)可增强BMSCs的成骨细胞分化。在卵巢切除(OVX)小鼠模型中,氨来呫诺通过抑制破骨细胞活性来预防OVX诱导的骨丢失[3]。

二、氨来呫诺的活性实验方法:
1)动物实验
向野生型雄性C57BL/6小鼠喂食含有45%卡路里的HFD,从8周龄开始,持续12-24周,而NDC57BL/6对照维持在由4.5%脂肪组成的正常食物饲料中。饲喂含有ω-3脂肪酸的C57BL/6日粮。通过在已经在HFD上持续16周的小鼠中将化合物添加到饮食中来施用罗格列酮治疗三周。每只小鼠平均每天消耗3.5mg/kg罗格列酮。氨来呫诺通过每日口服强饲法给药。对于预防组,氨来呫诺(25mg/kg或100mg/kg)与8周龄HFD喂养同时开始。对于治疗组,在HFD12周后,在20周龄时开始每公斤25mg氨来呫诺治疗。

为了测试氨来呫诺戒断的效果,在氨来呫诺处理8周后,处理组中的小鼠从氨来呫诺管饲法转换为载体对照。对照和ob/ob小鼠用正常饲料喂养,并在10周龄时开始用100mg/kg氨来呫诺或载体对照强饲。将动物饲养在无特定病原体的设施中,12小时光照/12小时黑暗循环,并自由获取食物和水。

2)细胞实验
为了检查细胞增殖,根据制造商的说明使用细胞计数试剂盒-8。将BMM以5×103个细胞/孔的密度接种在96孔板中。24小时后,在M-CSF(30ng/mL)存在下,每2天用不同浓度的氨来呫诺(0,1.5,3,6,12,25μM)处理细胞7天。在1,3,5和7天后,用含有10%CCK-8的培养基替换培养基,并将细胞在37℃下再培养2小时。然后在ELX800吸光度酶标仪上在450nm波长下测量吸光度。

3)激酶实验
通过将纯化的激酶(IKKε或TBK1)在含有25mMTris(pH7.5),10mMMgCl2,1mMDTT和10μMATP的激酶缓冲液中于30℃温育30分钟来进行体外激酶测定。每个样品存在0.5μCiγ-[32P]-ATP和1μgMBP作为底物。通过加入4x十二烷基硫酸钠(SDS)样品缓冲液并在95℃下煮沸5分钟来终止激酶反应。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离上清液,转移至硝酸纤维素,并使用Typhoon9410磷成像仪通过放射自显影分析。

综上所述:氨来呫诺氨来呫诺是特异性的IKKε和TBK1抑制剂,IC50值为1-2μM。它的靶点活性为FGFR1,IL-3,ProteinS100-P。

参考文献:
[1]. Reilly SM, et al. An inhibitor of the protein kinases TBK1 and IKK-e improves obesity-related metabolic dysfunctions in mice. Nat Med. 2013 Mar;19(3):313-21.
[2]. Bell, J. AmLexanox for the treatment of recurrent aphthous ulcers. Clin Drug Investig, 2005. 25(9): p. 555-66.
[3]. Zhang Y, et al. AmLexanox Suppresses Osteoclastogenesis and Prevents Ovariectomy-Induced Bone Loss. Sci Rep. 2015 Sep 4;5:13575.

相关化合物:氨来呫诺

上一篇:乐伐替尼的作用和生物活性

下一篇:丙氨酸布立尼布的作用和生物活性