| 描述 |
A 438079是P2X7受体拮抗剂,能抑制人重组P2X7细胞系的钙流,pIC50为6.9。
|
| 相关类别 |
|
| 靶点 |
pIC50: 6.9 (P2X7 receptor)
|
| 体外研究 |
在稳定表达大鼠P2X7受体的1321N1细胞中,A 438079阻断BzATP-(10μM)引起细胞内钙浓度的变化,IC50为321nM。对于P2X7受体,438079也具有选择性,浓度高达100μM[1]。
|
| 体内研究 |
438079(80μmol/ kg,iv)减少神经病大鼠中不同类型的脊髓神经元的有害和无害的诱发活动。在SNL和CCI模型中,438079(100和300μmol/ kg,ip)显着提高了戒断阈值[1]。在触发癫痫发作后60分钟腹膜内注射A 438079(5和15mg/kg)可减少海马内的癫痫发作严重程度和神经元死亡。与同等剂量的苯巴比妥(25 mg/kg)相比,438079具有更好的神经保护作用[2]。 438079部分但显着地阻止了6-OHDA诱导的纹状体DA储存的消耗[3]。使用A 438079预处理可降低HC模型中的伤害性行为评分[4]。
|
| 激酶实验 |
使人星形细胞瘤细胞1321N1生长以稳定表达大鼠P2X7，人P2X4，P2X2a，P2X2 / 3，P2X1，P2Y1和P2Y2重组受体。使用Ca2 +螯合染料Fluo-4与所有细胞系评估激动剂，BzATP，2,3-O-（4-苯甲酰基苯甲酰基）-ATP或ATP诱导的细胞内Ca2 +浓度变化。荧光成像板读取器。在实验前一天将细胞铺在聚-D-赖氨酸包被的黑色96孔板上。加入激动剂后，每秒记录细胞内Ca2 +浓度的变化，持续3分钟。配体在11个半对数浓度下从10-10到10-4M进行测试.BzATP或ATP浓度对应于每种受体的EC70值，以能够比较多种P2受体亚型的拮抗剂效力。将438079加入细胞板中，并在加入激动剂之前收集荧光数据3分钟，随后收集数据另外2分钟。 pEC50或pIC50值来自单曲线。
|
| 动物实验 |
为确认A 438079在全身给药后到达大脑，将P10大鼠幼鼠注射5mg / kg A 438079并在10分钟，30分钟或2小时后杀死（每组n = 4）。将血液样品以1000×g离心10分钟以分离血浆。由服务提供者使用液相色谱 - 质谱（LC-MS / MS）分析样品。简而言之，蛋白质从50μL等分试样的单个血浆或脑组织匀浆中沉淀，A 438079通过LC-MS / MS从五点标准曲线定量。
|
| 参考文献 |
[1]. McGaraughty S, et al. P2X7-related modulation of pathological nociception in rats. Neuroscience. 2007 Jun 8;146(4):1817-28. [2]. Mesuret G, et al. CNS Neurosci Ther. 2014 Jun;20(6):556-64. [3]. Marcellino D, et al. On the role of P2X(7) receptors in dopamine nerve cell degeneration in a rat model of Parkinson's disease: studies with the P2X(7) receptor antagonist A-438079. J Neural Transm (Vienna). 2010 Jun;117(6):681-7. [4]. Martins JP, et al. The role of P2X7 purinergic receptors in inflammatory and nociceptive changes accompanying cyclophosphamide-induced haemorrhagic cystitis in mice. Br J Pharmacol. 2012 Jan;165(1):183-96.
|
