体外研究 |
用SJ000291942处理的胚胎显示最严重的腹侧化,SJ000291942也是最有效的。与对照和其他两种化合物相比,SJ000291942也导致更高的死亡率和更低的剂量。这表明我们的化合物导致胚胎的腹侧化与增加的BMP信号传导活性一致。 SJ000291942导致bmp2b和szl表达增加。斑马鱼分析表明SJ000291942激活经典BMP信号通路。为了扩展这些观察结果,进行了在不同时间用SJ000291942刺激的C33A-2D2细胞的蛋白质裂解物的免疫印迹。 SJ000291942在无血清培养基中激活SMAD1/5/8的磷酸化。与斑马鱼胚胎一样,SJ000291942最活跃。 SJ000291942在处理1小时时最大诱导p-SMAD1/5/8。用SJ000291942处理的来自C33A-2D2的裂解物的免疫印迹分析揭示了SJ000291942对磷酸化的细胞外信号调节的蛋白激酶ERK1/2(P-ERK1/2)的明显诱导。最高剂量(100和300ng)BMP4处理产生与成骨细胞表达最相似的基因表达特征。低剂量(10ng)BMP4处理与25μM化合物3处理和25μMSJ000291942密切配合[1]。
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