描述 |
CeMMEC13 是一种有效的 TAF1 (2) 抑制剂,IC50 值为 2.1 μM。
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相关类别 |
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靶点 |
IC50: 2.1 μM (TAF1 (2))[1]
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体外研究 |
CeMMEC13是TAF1(2)溴结构域的有效抑制剂,IC50为2.1μM。 CeMMEC13对REDNESS,BRD4,CREBBP几乎没有影响。 CeMMEC13(0-20μM)与(S)-JQ1组合可增加REDS3细胞中的RFP表达,并且有效降低H23和THP1细胞的活力,优于单一治疗[1]。
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激酶实验 |
使用EPIgeneous Binding Domain试剂盒B进行TAF1结合测定。通过使用HTRF与Eu3 + - 缀合的GST抗体供体和链霉抗生物素蛋白缀合的受体从GST标记的TAF1蛋白置换乙酰化的生物素肽来确定结合。使用Echo 525液体处理器将化合物(CeMMEC13)分配到测定板ProxiPlate-384 Plus中。用5nM TAF1-GST,50nM肽(SGRGK(ac)GGK(ac)GLGK(ac)GGAK(ac)RHRK(生物素) - 酸),终体积20μL进行结合测定,6.25nM链霉抗生物素蛋白 - XL665,1:200抗GST-Eu3 +穴状化合物和0.1%DMSO。使用Multidrop combi将测定试剂分配到板中,并在室温下孵育3小时。使用具有双发射方案的HTRF模块(A = 320nm的激发,665nm的发射,B = 320nm的激发,620nm的发射),使用PHERAstar酶标仪测量荧光。处理原始数据以得到HTRF比率(通道A / B×10,000),其用于生成IC50曲线[1]。
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细胞实验 |
将细胞接种在透明平底96孔或384孔板上,并用指定化合物(CeMMEC13)处理特定条件。活细胞成像图片采用Operetta高内容筛选系统,20倍物镜和非共聚模式[1]。
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参考文献 |
[1]. Sdelci S, et al. Mapping the chemical chromatin reactivation landscape identifies BRD4-TAF1 cross-talk. Nat Chem Biol. 2016 Jul;12(7):504-10.
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