| 描述 |
SAR131675是有效,选择性的 VEGFR3 抑制剂,IC50 值为23 nM。
|
| 相关类别 |
|
| 靶点 |
VEGFR3:23 nM (IC50)
|
| 体外研究 |
AR131675对VEGFR-3具有高选择性,与107种受体,酶,离子通道和65种激酶相比。然而,它对VEGFR-2具有中度活性,VEGFR-3/VEGFR-2比率约为10.SAR131675抑制HEFR细胞中VEGFR-3酪氨酸激酶活性和VEGFR-3自身磷酸化,IC50值分别为20和45 nM 。 SAR131675剂量依赖性地抑制由VEGFR-3配体VEGFC和VEGFD诱导的原代人淋巴细胞的增殖,IC50为约20nM。 SSAR131675对一组30个肿瘤和原代细胞没有抗增殖活性,进一步显示其高特异性,表明SAR131675不是细胞毒性或细胞抑制剂[1]。
|
| 体内研究 |
SAR131675在小鼠中具有非常好的耐受性,并且在几种原位和同系模型中显示出有效的抗肿瘤作用,包括乳腺4T1癌和RIP1Tag2肿瘤。有趣的是,它显着减少淋巴结侵袭和肺转移,显示其体内抗淋巴管生成活性。 SAR131675显着降低4T1肿瘤中的TAM浸润和聚集[1]。
|
| 激酶实验 |
多孔板预涂有合成聚合物基质poly-Glu-Tyr（polyGT 4：1）。在补充有ATP和二甲基亚砜（DMSO）的激酶缓冲液（10×：50mM HEPES缓冲液，pH7.4,20mM MgCl 2,0.1mM MnCl 2和0.2mM Na 3 VO 4）存在下进行反应，用于阳性对照（ C +）或SAR131675（范围为3-1,000 nM）。对于VEGFR-1和VEGFR-3，ATP使用30μM，对于VEGFR-2，ATP使用15μM。用与辣根过氧化物酶偶联的磷酸酪氨酸特异性单克隆抗体（mAb）探测磷酸化的poly-GT，并在黑暗中用HRP显色底物（OPD）显色。然后通过加入100μL1.25mol/ L H 2 SO 4终止反应，并使用Envision分光光度计在492nm处测定吸光度[1]。
|
| 细胞实验 |
将HLMVEC接种在涂有0.3％明胶（每孔5000个细胞）的96孔板中。在不存在或存在SAR131675的情况下，将细胞在RPMI 0.1％FCS中与VEGFA（10ng / mL）VEGFC（300ng / mL），VEGFD（300ng / mL）或FGF2（10ng / mL）一起温育。五天后，用细胞Titer-glo发光细胞活力测定法定量活细胞[1]。
|
| 动物实验 |
小鼠：将用200μgFGF2或PBS浸渍的无菌海绵盘皮下引入麻醉小鼠的背部。前2天将FGF2重新注入海绵中。在海绵植入当天开始每日口服SAR131675（30,100和300mg / kg / d）。七天后，将动物安乐死并取出海绵，收获并在4℃下在RIPA缓冲液中裂解。在6,000×g离心后，收集上清液用于进一步分析[1]。
|
| 参考文献 |
[1]. Alam A, et al. SAR131675, a potent and selective VEGFR-3-TK inhibitor with antilymphangiogenic, antitumoral, and antimetastatic activities. Mol Cancer Ther. 2012 Aug;11(8):1637-49.
|
