| 描述 |
O-propargyl-puromycin是嘌呤霉素的炔类似物; 是蛋白质合成的高效抑制剂。
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| 相关类别 |
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| 体外研究 |
O-炔丙基嘌呤霉素可用于对细胞和动物中的新生蛋白进行成像和亲和纯化。 O-炔丙基嘌呤霉素抑制网织红细胞裂解物和培养细胞中的蛋白质合成,显示出比未修饰的嘌呤霉素低2至3倍的效力。 O-炔丙基-嘌呤霉素与新生多肽链形成共价缀合物,其由蛋白酶体快速翻转并且可以通过铜(I)催化的叠氮化物-炔烃环加成来可视化或捕获。 [1]。
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| 体内研究 |
来自未注射小鼠的组织显示低非特异性染色,而来自O-炔丙基-嘌呤霉素注射小鼠的组织显示O-炔丙基-嘌呤霉素掺入新生蛋白质的特定模式。在小肠中,翻译在隐窝和肠绒毛的基部中的细胞中最强,与这些细胞的高增殖和分泌活性一致。 Paneth细胞中的染色特别强烈,Paneth细胞位于隐窝底部附近,并充满分泌囊泡。 Paneth细胞中囊泡的强烈O-炔丙基嘌呤标记表明,过早终止的O-炔丙基嘌呤霉素偶联的分泌蛋白易位到内质网(ER)腔[1]。
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| 动物实验 |
小鼠：将100μL的20mM O-炔丙基 - 嘌呤霉素的PBS溶液腹膜内注射到3周龄小鼠中，并将注射100μLPBS的小鼠用作阴性对照。 1小时后收获各种器官，并在福尔马林中固定过夜。将器官碎片包埋在石蜡中，切片，并用二甲苯洗涤以除去石蜡。在用乙醇洗涤并在TBS中再水合后，用20μM四甲基罗丹明（TMR） - 叠氮化物对组织切片染色。组织切片用Hoechst复染，安装在标准封固剂中，然后通过荧光显微镜和DIC [1]成像。
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| 参考文献 |
[1]. Liu J, et al. Imaging protein synthesis in cells and tissues with an alkyne analog of puromycin. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012 Jan 10;109(2):413-8.
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