| 描述 |
T-3775440 (hydrochloride) 是一种赖氨酸特异性脱甲基酶1 (LSD1) 的不可逆性抑制剂,其 IC50 值为 2.1 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 2.1 nM (LSD1)[1].
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| 体外研究 |
T-3775440表现出对重组人LSD1的不可逆抑制,其kinact/KI值为1.7×105(sec-1M-1)。相对于其他单胺氧化酶(例如,MAO-A和MAO-B),T-3775440对LSD1具有高选择性,IC50值为2.1nM)。 T-3775440在治疗第3天尽快阻断几种细胞系的增殖。值得注意的是,响应于T-3775440处理,粒细胞/巨噬细胞标记物CD86和CD11b通常在TF-1a和HEL92.1.7细胞上被上调,而红细胞标记物CD235a和CD71通过该处理下调。在CMK11-5细胞中,T-3775440也以浓度依赖性方式明显上调CD86 mRNA表达,尽管仅观察到细胞表面CD86表达的适度增加。 T-3775440处理以浓度依赖性方式破坏LSD1-GFI1B缔合。 T-3775440降低LSD1结合但不降低GFI1B结合并增加PI16基因座处二甲基化H3K4的水平[1]。
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| 体内研究 |
在口服施用3至30mg/kg的单剂量后,T-3775440以剂量依赖性方式上调HEL92.1.7细胞的肿瘤异种移植物中的CD86 mRNA表达。为了研究该化合物在肿瘤中的靶标参与,测试PI16表达水平作为直接生物标志物。正如预期的那样,通过T-3775440处理可显着逆转PI16抑制。在TF-1a(AEL)肿瘤异种移植模型中,T-3775440表现出显着的抗肿瘤效果,15天T/C值分别为15.6％和20％和40mg/kg剂量时<0％。 T-3775440还在HEL 92.1.7的另外的AEL模型和CMK11-5的AMKL模型中显示出有效的抗肿瘤作用,导致在给药期间几乎完全的肿瘤生长抑制。结果发现,在小鼠中,T-3775440处理导致血小板短暂减少,随后显着反弹;这被认为是LSD1抑制的基于机制的副作用。在包括5天/ 2天休息的给药方案中,在较高剂量的载体和T-3775440处理的肿瘤异种移植模型小鼠之间观察到体重的统计学显着差异。然而,在所有皮下肿瘤异种移植模型中都能耐受有效的T-3775440剂量[1]。
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| 细胞实验 |
使用人白血病细胞系TF-1a，HEL92.1.7，CMK11-5和M07e。所有细胞在RPMI1640加10％FBS中生长，并保持在37℃和5％CO 2的潮湿培养箱中。为了评估人白血病细胞系中的细胞增殖和活力，在细胞接种后24小时加入不同浓度（T-3775440：0,10,50nM）的化合物（例如T-3775440）。孵育期后，用CellTiter-Glo裂解细胞，并使用ARVO MX1420酶标仪检测发光信号。对于细胞周期分析，将细胞用70％乙醇固定过夜。固定细胞用碘化丙锭染色，并在FACSCalibur或FACSVerse流式细胞仪上分析[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[1]使用雌性C.B17 / Icr-scid / scid Jcl小鼠并在特定的无病原体条件下维持。将基质胶中的AML细胞（2×10 6个细胞）皮下接种到6至7周龄小鼠的左侧（第0天）。当平均肿瘤体积达到约150至350mm 3时，小鼠随机化。随后，给小鼠施用载体或T-3775440单剂量，范围为3至30mg / kg，每天一次，每天5天，每天2天，每天2天。每周两次，用游标卡尺测量肿瘤，并计算肿瘤体积[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Ishikawa Y, et al. A Novel LSD1 Inhibitor T-3775440 Disrupts GFI1B-Containing Complex Leading to Transdifferentiation and Impaired Growth of AML Cells. Mol Cancer Ther. 2017 Feb;16(2):273-284.
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