Daun02

Daun02是拓扑异构酶抑制剂Daunorubicin的前药。

信号通路 >> 抗体- 药物偶联物 >> ADC细胞毒素

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 拓扑异构酶

研究领域 >> 癌症

Topoisomerase

Daun02是一种前药,由β-半乳糖苷酶转化为柔红霉素,已被证明可降低神经母细胞瘤细胞中钙离子(Ca2 +)依赖的动作电位[1]。柔红霉素是一种拓扑异构酶抑制剂[2]。 Daun02是β-半乳糖苷酶(β-gal)的良好底物。对于T47-D,Panc02和MCF-7,产生50％(EC50)细胞存活率降低的Daun02浓度分别为0.5μM,1.5μM和3.5μM[3]。

Daun02是β-gal的良好底物,Km和Vmax值为0.37mM和8.6μmol/ min/mg蛋白质。浓度为10-5M时,Daun02与血浆蛋白结合的比例为79％,而道诺霉素则为94％[3]。

将鼠Panc02细胞维持为在37℃下补充有10％FBS，1％谷氨酰胺，青霉素和链霉素的DMEM / F12或RPMI-1640培养基中的指数生长单层培养物。对于细胞毒性测定，将细胞接种到96孔微量培养板中并孵育过夜。初步实验表明，FBS含有低水平的内在β-gal活性，如Daun02向道诺霉素的缓慢转化所证明的;然而，这对人血清来说并不明显。因此，在添加DaunO 2之前，对于Panc02细胞，FBS浓度从10％降低至1％。人血清（10％）用于转导的人细胞系。将细胞温育24小时，然后加入MTT。加入MTT后4小时加入裂解缓冲液（20％SDS溶于50％DMF），将细胞培养过夜。使用BIO-RAD酶标仪测定570nm处的光密度。细胞毒性表示为药物或前药的浓度，其导致细胞活力降低50％（EC50）[3]。

小鼠[3]使用雄性无胸腺BALB / c小鼠（nu / nu基因型，18-20g）。道诺霉素以20mg / kg的剂量在100μL生理盐水溶液中施用到尾静脉中。在200μL载体中以200mg / kg的剂量腹膜内施用Daun02。 （选择该途径是因为药物溶液的体积，200μL，对于尾静脉给药而言太大。）肿瘤体积通过二维测量确定并转化为肿瘤质量。在30天的时间内监测肿瘤生长或直至肿瘤达到体重的5％（约1g）。然后通过二氧化碳窒息杀死动物。

[1]. Koya E, et al. Targeted disruption of cocaine-activated nucleus accumbens neurons prevents context-specific sensitization. Nat Neurosci. 2009 Aug;12(8):1069-73.

[2]. Lehmann M, et al. Activity of topoisomerase inhibitors daunorubicin, idarubicin, and aclarubicin in the Drosophila Somatic Mutation and Recombination Test. Environ Mol Mutagen. 2004;43(4):250-7.

[3]. Farquhar D, et al. Suicide gene therapy using E. coli beta-galactosidase.Cancer Chemother Pharmacol. Cancer Chemother Pharmacol. 2002 Jul;50(1):65-70.

Alpha-毒伞肽 | 一甲基澳瑞他汀E | 喜树碱 | 7-乙基-10羟基喜树碱 | 卡利奇霉素 | 依沙替康甲磺酸盐 | 盐酸依达比星 | β-拉帕醌 | 白桦脂酸 | MMAF盐酸盐 | 替尼泊苷 | 安吖啶 | N,BETA,BETA-三甲基-L-苯基丙氨酰基-N-[(1S,2E)-3-羧基-1-(1-甲基乙基)-2-丁烯基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺 | PNU-159682 | TAS-103二盐酸盐