一、酸性来源与逐级pKa
2,3',4,4'-四羟基二苯甲酮的分子式为C₁₃H₁₀O₅，结构为(2,4-二羟基苯基)(3,4-二羟基苯基)甲酮。四个酚羟基构成四质子酸体系，以H₄A表示中性分子。羰基通过诱导和共轭作用降低酚氧负离子的形成能垒，使酚羟基酸性显著高于苯酚。2-位羟基受邻位羰基的分子内氢键和电子效应共同作用，首先解离；4-位和4'-位羟基处于羰基对位，依次解离；3'-位羟基处于间位，受羰基影响最弱，最后解离。水溶液表观逐级pKa为pKa₁ 7.0、pKa₂ 8.2、pKa₃ 9.5、pKa₄ 10.5。对应平衡为：
H₄A ⇌ H₃A⁻ + H⁺
H₃A⁻ ⇌ H₂A²⁻ + H⁺
H₂A²⁻ ⇌ HA³⁻ + H⁺
HA³⁻ ⇌ A⁴⁻ + H⁺
二、不同pH下的主要存在形式
pH低于6.0时，H₄A为优势物种，分子呈电中性，水溶性最低。pH 6.0–7.0区间为H₄A与H₃A⁻的缓冲过渡区，pH 7.0时两者浓度相等。pH 7.0–8.2区间H₃A⁻占优，生理pH 7.4下以单阴离子为主，并含少量H₄A和H₂A²⁻。pH 8.2时H₃A⁻与H₂A²⁻等浓度。pH 8.2–9.5区间H₂A²⁻占优，该区间对应两个对位酚羟基的连续解离。pH 9.5时H₂A²⁻与HA³⁻等浓度。pH 9.5–10.5区间HA³⁻占优。pH高于10.5后A⁴⁻成为主要形式，四个酚羟基全部去质子化。
三、pH控制的技术意义
pH直接决定该化合物的溶解度、紫外吸收、抗氧化活性和色谱行为。中性H₄A水溶性低，在有机相萃取和低pH样品前处理中占优；pH提高到8.5–9.5后，H₂A²⁻和HA³⁻比例上升，水相溶解度显著增加。酚氧负离子使紫外吸收红移并增强，碱性条件下吸光度增大。抗氧化与自由基捕获以中性酚羟基的氢原子转移为主，强碱性下酚氧负离子比例升高，反应路径转向电子转移。3',4'-邻二酚结构在pH 8以上更易与金属离子形成螯合物，同时酚氧负离子对氧敏感，强碱性条件促进氧化生成醌类产物。反相液相色谱中，pH 2–3抑制酚羟基解离，保留时间稳定；pH 7.4以上阴离子比例升高，保留时间缩短。LC-MS负离子模式检测时，单电荷去质子化离子m/z 245.045为常用监测离子。