| 描述 |
KJ Pyr 9 是 MYC 的抑制剂。体外实验中, KJ Pyr 9 抑制 MYC 的 Kd 值为 6.5±1.0 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Kd: 6.5±1.0 nM (MYC)[1]
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| 体外研究 |
如蛋白质片段互补测定所示,KJ Pyr 9(KJ-Pyr-9)干扰细胞中MYC-MAX复合物的形成。 KJ Pyr 9特异性抑制MYC诱导的细胞培养中的致癌转化;它对几种不相关的癌蛋白的致癌活性没有影响或只有很弱的影响。 KJ Pyr 9优先干扰MYC过表达的人和禽细胞的增殖,并特异性地降低MYC驱动的转录特征。测试了针对三种细胞系的KJ Pyr 9依赖于增加的MYC活性：NCI-H460,MDA-MB-231和SUM-159PT。所有测试细胞系的增殖受到抑制,IC50值在5和10μM之间。此外,显示c-MYC组成型高表达的伯基特淋巴瘤细胞系的增殖对KJ Pyr 9更敏感(IC50值在1和2.5μM之间)[1]。
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| 体内研究 |
为了测试KJ Pyr 9(KJ-Pyr-9)的体内有效性,裸鼠接受悬浮在基质胶中的异种移植物MDA-MB-231细胞,并将皮下注射到左侧和右侧腹中。当肿瘤达到100mm 3的平均体积时,通过ip注射每天用10mg/kg KJ Pyr 9或载体对照处理小鼠31天。在治疗8天后注意到KJ Pyr 9对肿瘤生长的抑制。到第31天,KJ Pyr 9处理的动物的肿瘤体积没有显着增加。在实验结束时,提取肿瘤并称重。体重测量与体积测定一致,并证实了KJ Pyr 9阻止肿瘤生长的能力[1]。
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| 细胞实验 |
测定使用氧化还原染料刃天青染色来测量细胞活力。将细胞以每100μL103孔接种于96孔板中，并在2.5％FBS存在下生长。 MDA-MB-231细胞在DMEM中培养; SUM-159PT细胞在HAM的F12中培养;和NCI-H460细胞在RPMI-1640中培养。将MDA-MB-231细胞暴露于KJ Pyr 9（KJ-Pyr-9）216小时，在120和192小时提供含有新化合物的培养基;将SUM-159PT细胞暴露于化合物120小时，并在48小时提供具有适当化合物浓度的新鲜培养基;和NCI-H460细胞与化合物一起生长72小时。将P493-6细胞的一式三份培养物在6孔板中培养，每孔4mL培养基中起始密度为1×10 5个细胞/ mL。细胞接种后立即加入化合物。加入化合物后，通过以400rpm涡旋板10秒钟来分配细胞。涡旋后取出100微升样品，并在孵育0,12,24,36,48,60,72和96小时使用Beckman Coulter Z1计数器计数[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[1]将10只8周龄雌性裸鼠（HSD：无胸腺裸 - Foxn1nu）注射5×106个MDA-MB-231细胞皮下注射到左侧和右侧腹部。注射前将细胞悬浮在高浓度Matrigel中。允许异种移植肿瘤生长，直到肿瘤的平均体积达到100mm 3，如通过外部卡尺测量的。此时，将小鼠分成两组。一只接受10mg / kg KJ Pyr 9，另一只接受载体，每天通过ip注射给药。每天测量肿瘤体积和小鼠体重。在所有情况下使用的载体是10:10:80吐温80：DMSO：5％葡萄糖水溶液。处理小鼠31天。在实验结束时，对小鼠实施安乐死并切除肿瘤。肿瘤称重。将每个肿瘤的样品固定在福尔马林中用于组织学并冷冻用于Western印迹。
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| 参考文献 |
[1]. Hart JR, et al. Inhibitor of MYC identified in a Kr?hnke pyridine library. Proc Natl Acad Sci U S A. 2014 Aug 26;111(34):12556-61.
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