| 描述 |
BI-847325是MEK 和极光激酶 (AK)的ATP竞争性双重抑制剂, 对人类MEK2和AK-C的IC50值分别为4和15 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
MEK2:4 nM (IC50)
Aurora C:15 nM (IC50)
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| 体外研究 |
BI 847325抑制X.laevis AK-B的活性,IC50为3 nM;人AK-A和AK-C的IC 50值分别为25和15nM。 BI 847325还抑制人MEK1和MEK2,各自的IC 50值为25和4nM。在1,000nM的BI 847325抑制6种酶超过50％(LCK,MAP3K8,FGFR1,AMPK,CAMK1D和TBK1),并且IC50值仅对于LCK(5nM)和MAP3K8(93nM)低于100nM。 A375和Calu-6细胞系的增殖受到抑制,GI50值分别为7.5 nM和60 nM [1]。
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| 体内研究 |
每天口服施用10mg/kg的BI 847325在BRAF-和KRAS-突变异种移植模型中均显示出功效。每周一次以70mg/kg施用BI 847325抑制KRAS突变体肿瘤中的MEK和AK [1]。
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| 激酶实验 |
使用10μM底物在100μMATP存在下进行测定。将30μL蛋白质-MIX在25％DMSO中孵育并在室温下孵育15分钟。加入10μLPEPTIDE-MIX，将混合物在室温下孵育60分钟，并通过加入180μL6.4％TCA（终浓度：5％）终止。在闪烁计数器中测量掺入的磷酸盐，并使用具有可变坡度的S形曲线分析程序计算IC 50值[1]。
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| 细胞实验 |
将细胞以96孔格式接种，并在细胞接种后24小时加入BI 847325。同时，固定“时间零”未处理的细胞板。将化合物连续稀释并一式两份测定8种浓度。孵育72小时后，固定细胞并用荧光核染料染色。使用四参数对数逻辑函数分析浓度 - 响应曲线，没有上限或下限。计算GI50 [1]。
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| 动物实验 |
小鼠：肿瘤移植的雌性BomTac：NMRI-Foxn1nu小鼠用于该研究。将BI 847325溶于含有3％吐温80的0.5％Natrosol 250 HX中并超声处理直至获得均匀的悬浮液，然后加入1M HCl并将悬浮液涡旋并再次超声处理。 MEK抑制剂GSK 1120212和AZD 6244分别悬浮在1％或0.5％Natrosol中。使用10mL / kg体重的给药体积，并用指定剂量和时间表的管饲针口服给予化合物。测量肿瘤体积，每天检查小鼠的临床症状，每天测定体重[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Sini P, et al. Pharmacological Profile of BI 847325, an Orally Bioavailable, ATP-Competitive Inhibitor of MEK and Aurora Kinases. Mol Cancer Ther. 2016 Oct;15(10):2388-2398.
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