| 描述 |
Esonarimod 是一种抗风湿药物。
|
| 相关类别 |
|
| 体外研究 |
Esonarimod(KE-298)(10至300μg/ mL)以剂量依赖性方式抑制RAW264.7细胞产生NO。 Esonarimod的IC50为117.5μg/ mL。在这些测试剂量下,Esonarimod不影响细胞活力。 Esonarimod对RAW264.7细胞的无细胞提取物中的NOS活性没有直接影响[1]。
|
| 体内研究 |
在重复口服Esonarimod(14C-KE-298)后,放射性迅速下降,没有发现累积倾向[2]。
|
| 激酶实验 |
使用针对NOS活性的测定试剂盒测定NOS的酶活性。简而言之，在Esonarimod（KE-298）存在下，将来自RAW264.7细胞的裂解物（蛋白质浓度为37.5μg/200μL）在37℃下与100mM L-精氨酸一起温育3小时并转化为监测L-精氨酸至亚硝酸盐。使用Griess试剂[1]测定反应混合物中产生的亚硝酸盐。
|
| 细胞实验 |
在该研究中使用RAW264.7细胞。对于NO生产，RAW264.7细胞[2×105 / 0.2 mL RPMI-1640补充10％热灭活胎牛血清（FBS），青霉素G（100 U / mL）和链霉素（100μg/ mL）]在96孔板中，在Esonarimod（KE-298）（0,10,30,100,200,300μg/ mL）存在下，用100ng / mL大肠杆菌026：B6脂多糖刺激，并在37℃温育24小时。在空气中5％CO 2的气氛中°C。孵育后，收集上清液并测定亚硝酸盐（NO2-）而不是NO [1]。
|
| 动物实验 |
在该研究中使用7周龄雄性Wistar大鼠。除了在重复口服给药后对组织分布的研究外，给药前动物禁食过夜并在给药后禁食最多4小时。将大鼠分组，每组3或4只大鼠。 Esonarimod（14C-KE-298）通过胃插管以5mg / kg的剂量口服给药，每天一次，持续21天。在给予Esonarimod后20分钟，24小时或21天，将大鼠用乙醚麻醉，并将血液样品从股动脉收集到肝素化容器中。切除肝脏，肾脏，肺，主动脉和皮肤并称重。将组织（主动脉除外）用冰冷的生理盐水匀浆，得到20％匀浆[2]。
|
| 参考文献 |
[1]. Inoue T, et al. KE-298 and its active metabolite KE-758 suppress nitric oxide production by murine macrophage cells and peritoneal cells from rats with adjuvant induced arthritis. J Rheumatol. 2001 Jun;28(6):1229-37. [2]. Hasegawa M, et al. Formation of a disulfide protein conjugate of the SH-group-containing metabolite (M-I) ofesonarimod (KE-298) and its elimination in rats. J Pharm Pharmacol. 2002 Apr;54(4):493-8.
|
