| 描述 |
STO-609是选择性和细胞可渗透的CaM-KK抑制剂, 对重组CaM-KKα和 CaM-KKβ的Ki值分别为80和15 ng/mL。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Ki: 80 ng/mL (CaM-KKα), 15 ng/mL (CaM-KKβ)[1]
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| 体外研究 |
STO-609抑制重组CaM-KKα和CaM-KKβ同种型的活性,Ki值分别为80和15ng/mL,并且还抑制它们的自身磷酸化活性。 STO-609对CaM-KK具有高选择性,对下游CaM激酶(CaM-KI和-IV)没有任何显着影响,并且该化合物对CaM-KII的IC 50值为10μg/ mL。 STO-609抑制组成型活性CaM-KKα以及野生型酶。在转染的HeLa细胞中,STO-609以剂量依赖性方式抑制Ca 2+诱导的CaM-KIV活化。 STO-609在浓度为1μg/ mL(80％抑制率)下显着降低SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中CaM-KK的内源活性[1]。
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| 激酶实验 |
将CaM-KI（2.5μg/ mL），CaM-KII（0.75μg/ mL），CaM-KIV（9μg/ mL）和mLCK（0.6μg/ mL）与40μM的syntide-2或50μMmLC一起温育肽（mLCK）在含有50 mM HEPES（pH 7.5），10 mM Mg（Ac）2,1 mM DTT，50μM[γ-32P] ATP（4500）的溶液（25μL）中于30°C保持5分钟cpm / pmol）在1mM CaCl2,2μMCaM存在下，在Me 2 SO中以不同浓度的STO-609（0-10μg/ mL），终浓度为4％）。蛋白激酶活性通过磷酸纤维素滤膜法测量。计算不存在STO-609时CaM-KI，CaM-KII，CaM-KIV和mLCK的比活性[1]。 STO-609结合在CaMKKβKD的ATP结合口袋中。 STO-609的抑制机制是ATP竞争性的[2]。
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| 参考文献 |
[1]. Tokumitsu H, et al. STO-609, a specific inhibitor of the Ca(2+)/calmodulin-dependent protein kinase kinase. J Biol Chem. 2002 May 3;277(18):15813-8. [2]. Kukimoto-Niino M, et al. Crystal structure of the Ca??/calmodulin-dependent protein kinase kinase in complex with the inhibitor STO-609. J Biol Chem. 2011 Jun 24;286(25):22570-9.
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