| 描述 |
NIK SMI1 是一种有效的选择性 NF-κB 诱导激酶 (NIK) 抑制剂,可抑制 NIK 催化的 ATP 水解为 ADP,IC50 为 0.23±0.17 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
NIK[1]
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| 体外研究 |
NIK SMI1(化合物4f)抑制NIK催化的ATP水解为ADP(荧光偏振,FP),IC50为0.23±0.17nM。 NIK SMI1在HEK293细胞中抑制NIK SMI1应答元件调节的萤火虫荧光素酶报告基因的表达,IC50为34±6nM。与对NIK抑制剂的预期一致,NIK SMI1显示抑制p52(RelB)的核转位(IC50 = 70nM)。 NIK SMI1在体外抑制BAFF诱导的B细胞(小鼠)存活,IC50为373±64 nM [1]。
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| 体内研究 |
在7天实验过程中,C57BL/6小鼠每天两次治疗7天,口服NIK SMI1或三次注射重组BAFF受体融合蛋白(Br3-mIgG2a)作为阳性对照。相对于剂量在100和200mg/kg之间的暴露的非线性是清除机制饱和的结果。在SD大鼠,CD-1小鼠,比格犬和食蟹猴中检测NIK SMI1的药理学,分别为20,32,18和7.8mL/kg/min。分布容积(Vd,L/kg)分别为1.35,1.58,0.778和1.39 [1]。
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| 细胞实验 |
将人B细胞重悬于含有10％FBS的RPMI中用于增殖测定，并将2.5％FBS重悬于存活测定中。将小鼠B细胞以50,000个细胞/孔接种在Co-star 96孔板中用于存活测定，或以150,000个细胞/孔接种用于增殖测定。将在DMSO中稀释的化合物（例如，NIK SMI1）（最终DMSO测定浓度= 0.1％）加入细胞中。将细胞与NIK SMI1（10-9nM，10-7nM，10-5nM，10-3nM，0.1nM和10nM）在37℃温育1小时。然后将刺激物加入板中，并在四天后测量存活或增殖。对于增殖测定，用抗IgM（20μg/ mL）或rhCD40L（10μg/ mL）或抗小鼠CD40（100ng / mL）处理细胞。对于BAFF存活测定，细胞用人或小鼠rBAFF以10ng / mL处理，然后用Cell Titer Glo测量第4天的存活率[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[1]使用年龄匹配的C57BL / 6小鼠。在这些实验中仅使用雌性小鼠。 NIK SMI1的单次口服剂量为10,20,60,100和200mg / kg。对于PO给药，手动限制动物，然后使用适当大小的管饲针通过口服管饲给药。监测动物的任何吸入或窘迫 - 呼吸异常，嗜睡，四肢等的迹象。对于样品采集，使用27G针（侧尾静脉）通过尾刺将每组3只小鼠放血总共8次。在每个时间点收集10μL血液并将其沉积到含有40μL1.7mg/ mL EDTA /水的预填充的costar簇管中，将管盖上盖子，投反对照5秒，然后储存在干冰上。将样品转移到-80°C冰箱中进行储存[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Blaquiere N, et al. Scaffold-Hopping Approach To Discover Potent, Selective, and Efficacious Inhibitors of NF-κB Inducing Kinase. J Med Chem. 2018 Aug 9;61(15):6801-6813.
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