| 描述 |
WIT 002 是 20-羟花生四烯酸 (20-HETE) 的一个拮抗剂。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
20-HETE[1].
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| 体外研究 |
A549细胞对花生四烯酸的ω-羟基化活性较高,因此,在侵袭试验中用HET0016或WIT 002处理A549细胞,两者均显着降低侵袭[2]。 WIT 002抑制786-O和769-P肾腺癌细胞的增殖,但HET0016和WIT 002不能抑制正常肾上皮细胞RPTC的增殖[2] [3]。
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| 体内研究 |
在肾肿瘤的异位小鼠模型中评估20-HETE拮抗剂WIT 002对786-O透明细胞肾癌生长的影响。每天向皮下注射细胞786-O的无胸腺裸鼠施用WIT 002显着抑制肿瘤的生长。肿瘤生长受到84％±128％的抑制。值得注意的是,在这些实验中,WIT 002治疗仅在肿瘤接种7-14天后才开始,并且相对较大,为0.1cm。因此,WIT 002可有效阻止相当晚期肿瘤的生长[3]。
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| 细胞实验 |
将人NSCLC细胞系（例如A549）接种到室的上部孔中。随后，将具有HET0016（10μM），WIT002（10μM），WIT003（0.01,0.1,1μM）或乙醇作为对照的无血清培养基添加至上室，同时将下部孔填充至顶部（500μL）含有5％胎牛血清（FCS）的RPMI-1640作为化学引诱物。使细胞迁移5小时。侵入过滤器底部表面的细胞用眼睛千分尺以盲法计数，计算最少10个高倍视野（HPF）[2]。将人肾细胞腺癌细胞系（RPTC）786-O或769-P细胞接种，第二天（0小时）转移至含有EGF或ET-1的无血清培养基中。将细胞暴露于10μMWIT002或载体。在转移至无血清培养基（0小时）和之后24,48和72小时的当天进行细胞计数。每24小时将培养基更换为含有促细胞分裂剂和药物的新鲜物。所呈现的数据是来自至少两个单独实验的特征实验，每个实验一式三份进行[3]。
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| 动物实验 |
小鼠[3]实验在体重为20-26g的6周免疫低效无胸腺裸鼠上进行。在注射肾细胞癌之前使动物适应1周。在每次植入之前，立即对细胞进行胰蛋白酶消化，计数并重悬于含有RPMI培养基的10％血清中。将细胞浓度调节至40百万/ mL，皮下注射4百万个细胞/动物。使细胞生长7-15天，直至肿瘤大小达到约0.1cm 3。然后小鼠每天皮下注射（sc）注射等渗NaPO 4缓冲液（pH 9.0）或载体（0.1M NaPO 4溶液pH 9.0）中的WIT 002（10mg / kg /天，200μL）。使用精密口径，每3-4天测量肿瘤直径，持续2周。在实验结束时，用CO 2对小鼠实施安乐死并切除肿瘤以确认直径测量值[3]。
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| 参考文献 |
[1]. Ming Yua . et al. Effects of a 20-HETE antagonist and agonists on cerebral vascular tone. Eur J Pharmacol. 2004 Feb 23;486(3):297-306. [2]. Wei Yu, et al. Cytochrome P450 ω-hydroxylase promotes angiogenesis and metastasis by upregulation of VEGF and MMP-9 in non-small cell lung cancer. Cancer Chemother Pharmacol. 2011 Sep; 68(3): 619-29. [3]. Anna Alexanian, et al. Down-regulation of 20-HETE Synthesis and Signaling Inhibits Renal Adenocarcinoma Cell Proliferation and Tumor Growth. Anticancer Res. 2009 October ; 29(10): 3819-3824.
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