| 描述 |
VO-Ohpic trihydrate 是一种高效的 PTEN 抑制剂,IC50 为 46±10 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 46±10 nM (PTEN)[1]
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| 体外研究 |
具有两个OHpic配体和氧配体的VO-OHpic是一种空间要求很高的分子,因此人们预期,由于空间位阻,结合底物会影响抑制剂的后续结合。 VO-OHpic在低纳摩尔浓度(IC50,46±10nM)中显着抑制PTEN活性,这与先前在基于PIP3的测定中确定的效力(IC50,35±2nM)一致。抑制常数Kic和Kiu分别被确定为27±6和45±11nM [1]。 VO-OHpic是一种令人鼓舞的特异性和有效的PTEN抑制剂。 VO-OHpic是PTEN脂质磷酸酶活性最有效的抑制剂(IC50 = 35 nM)[2]。
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| 体内研究 |
在缺血前30分钟通过腹膜内注射VO-OHpic(10μg/ kg)在小鼠中抑制PTEN,然后将它们暴露于缺血30分钟和再灌注120分钟。在实验结束时,通过三苯基四唑氯化物(TTC)测量心肌梗塞面积。在VO处理的小鼠中心肌梗塞面积显着减少(25±6对56±5％,n = 7,P <0.01)。这两组的风险区域没有差异(46±3对57±3％,n = 7,P> 0.05)[3]。
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| 激酶实验 |
将VO-OHpic溶解在DMSO（100μM）中并用1％DMSO进一步稀释至所需浓度。对于抑制研究，在加入底物以初始化反应之前，将PTEN与VO-OHpic在室温下预孵育10分钟。用测定缓冲液中的VO-OHpic测定背景吸光度（孔雀石绿测定）和荧光（OMFP测定），并在数据分析中校正[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[3]用雄性C57BL6小鼠进行实验。简而言之，用戊巴比妥（70mg / kg）麻醉小鼠。左冠状动脉闭塞在左耳廓下方约1-2mm处。通过松开结扎线完成再灌注。在缺血前30分钟，通过腹膜内注射以10μg/ kg的剂量施用PTEN抑制剂VO-OHpic。盐水用作对照。在实验结束时，通过横切主动脉并移除心脏来对动物实施安乐死，以确定梗塞面积。
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| 参考文献 |
[1]. Mak LH, et al. Characterisation of the PTEN inhibitor VO-OHpic. J Chem Biol. 2010 Oct;3(4):157-63. [2]. Rosivatz, E, et al. A small molecule inhibitor for phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10 (PTEN). ACS Chem Biol. 2006 Dec 15;1(12):780-90. [3]. Zu L, et al. PTEN inhibitors cause a negative inotropic and chronotropic effect in mice. Eur J Pharmacol. 2011 Jan 10;650(1):298-302.
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