| 描述 |
CHMFL-BMX-078是高效的,选择性的,不可逆的,类型II BMX激酶抑制剂,IC50值为11 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 11 nM (BMX)[1]
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| 体外研究 |
X染色体中的骨髓激酶(BMX,也称为ETK)是参与致瘤性,细胞运动性,粘附,血管生成,增殖和分化的非受体酪氨酸激酶。 CHMFL-BMX-078通过与BMX的DFG失活构象中的半胱氨酸496残基形成共价键而表现出11nM的IC 50。它在KINOMEscan评估中显示出针对468种激酶/突变体的高选择性特征,并且实现了比BTK激酶至少40倍的选择性(IC50 = 437nM)。对于BMX激酶的无活性状态,CHMFL-BMX-078显示81nM的结合Kd,而对于BMX激酶的活性状态,其表现出10200nM的结合Kd。 CHMFL-BMX-078表现出对BaF3-TEL-BMX细胞的抗增殖作用(GI50 =0.016μM)和对亲本BaF3细胞的选择性。对于BMX总酪氨酸磷酸化的抑制,CHMFL-BMX-078对BMX wt(EC50 = 5.8nM)的效力比C496S突变体(EC50 = 459nM)高约80倍。 CHMFL-BMX-078可作为阐明BMX介导的信号通路的详细机制的有用药理学工具[1]。
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| 体内研究 |
CHMFL-BMX-078在静脉注射中表现出短的半衰期(T1/2 = 0.80h)。 CHMFL-BMX-078在静脉注射中也显示出可接受的Cmax(13565.23ng/mL)和AUC0-t(1386.41ng/mLh)。然而,它不被口服吸收,表明当用作研究工具时,该化合物可通过静脉注射或腹腔注射给药[1]。
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| 激酶实验 |
激酶反应系统含有BMX或BTK，1μL连续稀释的CHMFL-BMX-078，以及具有100μMATP的底物多肽。通过加入ATP立即开始每个管中的反应，并在37℃下保持1小时。在室温下管冷却5分钟后，在384孔板中进行5μL溶剂反应。然后向每个孔中加入5μLADP-Glo试剂以停止反应并在40分钟内消耗剩余的ATP。最后，将10μL激酶检测试剂加入孔中并孵育30分钟以产生发光信号。用自动读板器[1]测量发光信号。
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| 动物实验 |
大鼠：将6只8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠禁食过夜，然后通过静脉内和口服给药开始药物治疗。动物采血时间点如下。对于组1,3和5（静脉内）：选择给药前后1分钟，5分钟，15分钟，30分钟，1小时，2小时，4小时，6小时和8小时。对于组2,4和6（口服）：给药前后5分钟，15分钟，30分钟，1小时，2小时，4小时，6小时，8小时和24小时。收集血浆用于分析[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Liang X, et al. Discovery of 2-((3-Acrylamido-4-methylphenyl)amino)-N-(2-methyl-5-(3,4,5-trimethoxybenzamido)phenyl)-4-(methylamino)pyrimidine-5-carboxamide (CHMFL-BMX-078) as a Highly Potent and Selective Type II Irreversible Bone Marrow Kinase in the X Chromosome (BMX) Kinase Inhibitor. J Med Chem. 2017 Mar 9;60(5):1793-1816.
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