100872-83-1

• 常用中文名：ML346
• 常用英文名：ML346
• CAS号：100872-83-1
• 分子式：C₁₄H₁₂N₂O₄
• 分子量：272.256
• 相关类别： 信号通路 细胞周期/DNA损伤 HSP
• 发布时间：2018-01-14 22:23:34
• 更新时间：2024-01-08 16:45:19
• ML346是 Hsp70 和 HSF-1 活性的激活剂,针对 Hsp70 的 EC50 为 4.6 μM。ML346 恢复构象疾病模型中的蛋白质折叠,而没有明显的细胞毒性或缺乏特异性。ML346 诱导了热休克反应 (HSR) 的基因和蛋白质效应子的特异性增加,包括伴侣蛋白如 Hsp70,Hsp40 和 Hsp27。

名称

• 英文名: 5-[(2E)-3-(4-Methoxyphenyl)-2-propen-1-ylidene]-2,4,6(1H,3H,5H)-pyrimidinetrione
• 英文别名: 2,4,6(1H,3H,5H)-Pyrimidinetrione, 5-[(2E)-3-(4-methoxyphenyl)-2-propen-1-ylidene]-; 5-[(2E)-3-(4-Methoxyphenyl)-2-propen-1-ylidene]-2,4,6(1H,3H,5H)-pyrimidinetrione; ML-346; ML346

物化性质

• 密度: 1.4±0.1 g/cm3
• 分子式: C₁₄H₁₂N₂O₄
• 分子量: 272.256
• 精确质量: 272.079712
• LogP: 0.88
• 折射率: 1.669
• 储存条件: -20°C，密闭，干燥

生物活性

• 描述: ML346是 Hsp70 和 HSF-1 活性的激活剂,针对 Hsp70 的 EC50 为 4.6 μM。ML346 恢复构象疾病模型中的蛋白质折叠,而没有明显的细胞毒性或缺乏特异性。ML346 诱导了热休克反应 (HSR) 的基因和蛋白质效应子的特异性增加,包括伴侣蛋白如 Hsp70,Hsp40 和 Hsp27。
• 相关类别:
  研究领域 >> 癌症
  信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> HSP
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> HSP
• 靶点:

  HSP70:4.6 μM (EC50, HeLa cells)

• 体外研究: ML346是Hsp70的激活剂,其EC50为4600nm。ML346(10μM)能恢复蛋白质的稳定性,恢复CFTR介导的碘电导,并增强两个不同细胞室表达的蛋白质的正确折叠[1]。ML346(化合物F1)诱导多种反应,并强烈诱导Hsp70、氧化应激反应基因(HO1和GCLM)和2.5倍的BiP上调。ML346(0.5-25μM)对严重热休克35分钟后的细胞具有保护作用,对H2O2诱导的细胞凋亡具有双重保护作用[2]。
• 体内研究: ML346抑制了秀丽隐杆线虫模型中polyQ35的聚集,表明该探针在修饰蛋白质聚集和相关毒性方面具有有效性[1]。
• 激酶实验: 总之，HeLa细胞与DMSO（阴性对照）、阳性对照MG132（10μM）和lactacystin（6μM）或PRs A1、A3和ML346（F1）孵育3和6小时，然后收获。在均匀化缓冲液（50 mmTris HCl、pH7.5、250 mM蔗糖、5 mmMGCl2、2 mmATP、1 mmDTT、0.5 mmEDTA、0.025%地高辛）中冰上裂解细胞5分钟，测定整个细胞提取物的总蛋白浓度。将3μg全细胞提取物与试验缓冲液（50 M M Tris HCl、pH 7.5、40 mM KCl、5 mM MgCl2、0.5 mM ATP、1 mM DTT、0.05 mg/mL BSA）组合在黑色96孔板中，通过添加2×200μM的含氟肽底物（如Vy AMC）开始反应。使用Synergy H4多模式微孔板阅读器每10分钟测量一次荧光[2]。
• 细胞实验: HeLa细胞在100μL DMEM中以10000个细胞/孔的密度在黑色96孔板中进行电镀，DMEM中添加10%FBS和1%Pen/Strep/Neo。在添加化合物之前，在37°C、5%CO2和95%相对湿度下培养板16小时。分别将1μL二甲基亚砜或二甲基亚砜中的命中化合物（ML346）添加到样品或对照孔中。然后将盘子放回培养箱中24小时。培养后，用200μL PBS洗涤细胞2×并向每个孔中加入200μL 1μg/mL calcein AM溶液。细胞在37°C，5%二氧化碳下孵育45分钟，然后使用分析员GT多模式阅读器进行荧光测量。细胞毒性百分比相对于仅用二甲基亚砜处理的含孔细胞表达（100%）[2]。
• 参考文献:

  [1]. Calamini B, et al. ML346: A Novel Modulator of Proteostasis for Protein Conformational Diseases.Probe Reports from the NIH Molecular Libraries Program. Bethesda (MD): National Center for Biotechnology Information (US); 2010-.2012 Dec 17.

  [2]. Calamini B, et al. Small-molecule proteostasis regulators for protein conformational diseases. Nat Chem Biol. 2011 Dec 25;8(2):185-96.