A-385358

A-385358 是 Bcl-XL 的一个选择性抑制剂,对于 Bcl-XL 和 Bcl-2 的 Ki 值分别为 0.80 和 67 nM。

信号通路 >> 细胞凋亡 >> Bcl-2家族

研究领域 >> 癌症

Bcl-xL:0.8 nM (Ki)

Bcl-2:67 nM (Ki)

A-385358是Bcl-XL的选择性抑制剂,在荧光偏振测定中Bcl-XL和Bcl-2的Kis分别为0.80和67nM。用A-385358处理IL-3剥夺的FL5.12/Bcl-XL细胞24小时导致细胞杀伤,EC50为0.47±0.05μM(n = 68)。这种效应伴随着胱天蛋白酶-3活性的增加。与Bcl-XL与Bcl-2疏水沟的亲和力更强一致,A-385358对IL-3耗尽的FL5.12/Bcl-2细胞(1.9±0.1μM; n = 55)的EC50为4-相对于细胞因子剥夺的FL5.12/Bcl-XL细胞,折叠率更高。此外,A-385358更有效地刺激从FL5.12/Bcl-XL分离的线粒体和Bcl-2细胞释放细胞色素c [1]。

与紫杉醇单一疗法相比,以100mg/kg /天加上较低剂量的紫杉醇给予的A-385358的组合产生肿瘤生长的显着降低(％T/C)。与载体对照相比,该组合还使肿瘤达到900mm 3(％ILS)的时间增加> 100％。在给药期间观察到A-385358的最大功效,在治疗终止后肿瘤生长缓慢但稳定地增加。 75mg/kg /天的A-385358和30mg/kg /天的紫杉醇的组合也是良好耐受的并且抑制肿瘤生长速率接近80％。观察到相对于紫杉醇单一疗法的肿瘤生长的显着影响,剂量低至50mg/kg/d [1]。

将悬浮在含有4％胎牛血清（FBS）的EMB生长培养基中的FL5.12细胞在10μMA-385358中于37℃温育1小时。在短暂离心后1小时孵育之前和之后，通过高效液相色谱法测定化合物浓度。为了分析化合物孵育后的膜结合级分，用10倍体积的冷PBS洗涤细胞一次，并用4mL水裂解。在离心之前和之后，从裂解物的等分试样确定A-385358浓度[1]。

将A549细胞（1×105）置于含有10％胎牛血清的培养基中的96孔板中。连接后，将A-385358加入到一组孔中（最终浓度为50μM，在10％FBS中），并将培养基加入另一组中。 [3H]将紫杉醇（5μM;0.5μCi/ mL终浓度）加入所有孔中，并将细胞在37℃下孵育不同的时间。对于冲洗实验，首先将细胞暴露于[3H]紫杉醇2小时。将细胞用培养基洗涤一次，然后与含有或不含有50μMA-385358的新鲜培养基在37℃下孵育不同的时间[1]。

对于功效研究，在50％基质胶中用1：5稀释的肿瘤brei接种雄性CD-1裸鼠并进行分析。 A-385358在含有5％吐温80,20％丙二醇和75％PBS（pH3.8）的载体中递送。紫杉醇根据制造商的建议配制。对于紫杉醇加A-385358的联合治疗，在用A-385358治疗前数小时给予两种药物腹腔注射紫杉醇（免疫组织化学研究除了观察MPM-2和caspase-3的表达，其中两种药物同时给予）[1]。

[1]. Shoemaker AR, et al. A small-molecule inhibitor of Bcl-XL potentiates the activity of cytotoxic drugs in vitro and in vivo. Cancer Res. 2006 Sep 1;66(17):8731-9.

维纳妥拉(ABT-199) | 生根粉263 | S63845 | 2-乙基-3-甲基戊酰胺 | 奥巴克拉甲磺酸盐 | 7-[5-[[4-[4-[(二甲基氨基)磺酰基]-1-哌嗪基]苯氧基]甲基]-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基]-1-[2-(4-吗啉基)乙基]-3-[3-(1-萘基氧基)丙基]-1H-吲哚-2-羧酸 | 醋酸艾塞那肽 | WEHI-539盐酸盐 | A-1331852 | Bax inhibitor peptide V5 | FX1 | 藤黄酸 | N-[4-(2-叔丁基苯磺酰基)苯基]-2,3,4-三羟基-5-(2-异丙基苄基)苯甲酰胺 | UMI-77 | 醋酸棉酚