LX2343

LX2343 是一种 BACE1 酶抑制剂,IC50 值为 11.43±0.36 μM。LX2343 是一种非 ATP 竞争性的 PI3K 抑制剂,IC50 为 15.99±3.23 μM。LX2343 刺激自噬促进 Aβ 清除。

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研究领域 >> 神经疾病

BACE1:11.43 μM (IC50)

PI3K:15.99 μM (IC50)

Aβ

Autophagy

LX2343(5-20μM)剂量依赖性地降低HEK293-APPsw和CHO-APP细胞中的Aβ积累,并促进SH-SY5Y细胞和原代星形胶质细胞中的Aβ清除。 LX2343通过Aβ产生抑制和清除促进改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能障碍,这突出了LX2343在AD治疗中的潜力。 HEK293-APPsw细胞和CHO-APP细胞的Western印迹结果表明LX2343不能调节BACE1蛋白水平,而体外BACE1酶活性测定表明LX2343剂量依赖性地降低BACE1活性(TDC作为阳性对照),IC50为11.43±0.36μM。为了测试LX2343和ATP之间是否存在竞争,我们研究了不同浓度的ATP对LX2343抑制活性的影响。结果表明,LX2343对PI3K的抑制实际上不受ATP的影响。因此,该结果表明LX2343是PI3K的非ATP竞争性抑制剂。在存在10μMATP的情况下,LX2343的IC50为13.11±1.47μM,在50μMATP存在下,LX2343的IC50为13.86±1.12μM,在100μMATP存在下,LX2343的IC50为15.99±3.23μM[1]。

APP/PS1小鼠表达嵌合的人瑞典突变APP和突变的人早老素1蛋白,并且广泛用作AD痴呆的有效动物模型。使用MWM测试在该模型中评估LX2343对记忆障碍的改善。在8-d训练试验中,用于寻找APP/PS1转基因小鼠平台的路径长度和逃逸潜伏期明显长于非转基因小鼠,而施用10 mg/kg LX2343明显对抗延长的路径长度并逃脱d 7和8的潜伏期。在探针试验测定中,与载体施用的转基因小鼠相比,施用LX2343的转基因小鼠更频繁地越过平台的隐藏位置[1]。

在体外使用BACE1活性试剂盒测定LX2343对BACE1酶的抑制。简言之，将BACE1底物（250nM），BACE1酶（0.35U / mL）和不同浓度的LX2343（5,10和20μM）在37℃在黑暗中依次温育1小时。荧光强度分别用545和585 nm的激发和发射波长测量[1]。

通过腺病毒用mRFP-GFP-LC3质粒转染SH-SY5Y细胞。在没有或使用链脲佐菌素（0.8mM）与5或20μMLX2343组合的情况下处理细胞4小时，然后用4％多聚甲醛固定并使用Olympus Fluoview FV1000共聚焦显微镜观察[1]。

使用小鼠[1] APP / PS1 [B6C3-Tg（APPswe，PS1dE9）]转基因小鼠。通过测定来自尾部活组织检查的DNA进行基因分型以确认其后代中的APP / PS1 DNA序列，其中Tg阴性小鼠作为阴性对照。将20只雄性APP / PS1小鼠分成两组，一组中有10只非转基因小鼠作为阴性对照。两个6个月的转基因组每天施用10mg / kg的LX2343或载体，并且通过腹膜内注射将6个月的非转基因组施用载体100天。施用100天后，应用MWM测定法在连续LX2343处理下评估小鼠的认知能力8天。完成MWM测试后，对小鼠实施安乐死，取出脑并在中矢状平面上对分。将右半球冷冻并储存在-80℃，左半球用4％多聚甲醛固定[1]。

[1]. Guo XD, et al. Small molecule LX2343 ameliorates cognitive deficits in AD model mice by targeting both amyloid β production and clearance. Acta Pharmacol Sin. 2016 Sep;37(10):1281-1297.

3-甲基腺嘌呤 | LY294002 | 渥曼青霉素 | Alpelisib (BYL719) | 5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺 | IPI549 | 2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺 | 艾代拉里斯 | Dactolisib (BEZ235) | 槲皮素 | SAR405 | 2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)-1-哌嗪基]甲基]-4-(4-吗啉基)噻吩并[3,2-D]嘧啶 | 维罗司他 | 740 Y-P | 4-氯-N-环己基-N-(苯基甲基)苯甲酰胺