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2-[[(2E)-3-(2-萘基)-1-氧代-2-丁烯基]氨基]苯甲酸

用途

BIBR 1532 是一种有效的,选择性的 telomerase 非竞争性抑制剂,IC50 值为 100 nM。

名称

[ CAS 号 ]:
321674-73-1

[ 中文名 ]:
2-[[(2E)-3-(2-萘基)-1-氧代-2-丁烯基]氨基]苯甲酸

[ 英文名 ]:
BIBR 1532

[英文别名 ]:

BIBR 1532

生物活性

[ 描述 ]:

BIBR 1532 是一种有效的,选择性的 telomerase 非竞争性抑制剂,IC50 值为 100 nM。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 端粒酶

研究领域 >> 癌症

[ 靶点 ]

IC50: 100 nM (telomerase)

[体外研究]

BIBR 1532非竞争性抑制端粒酶活性[1]。 BIBR 1532抑制JVM13白血病细胞的增殖,IC50为52μM,并且在其他白血病细胞系如Nalm-1,HL-60和Jurkat中也发生类似的作用。 BIBR 1532对急性髓性白血病(AML)具有抗增殖作用,IC50为56μM,对正常造血祖细胞的增殖能力没有影响[2]。 BIBR 1532(2.5μM)通过抑制MCF-7/WT和马法兰抗性MCF-7/MlnR细胞系中的端粒酶活性,降低集落形成能力,诱导端粒长度缩短并引起化学治疗致敏[3]。 BIBR 1532在T细胞幼淋巴细胞白血病(T-PLL)中以剂量依赖性方式具有细胞毒性[4]。 BIBR 1532与卡铂(一种化疗药物)联合可消除ES2,SKOV3和TOV112D细胞系中卵巢癌球体形成细胞[5]。

[激酶实验]

对于使用内源性端粒酶的直接端粒酶测定，将10μL富含端粒酶的提取物与不同浓度的BIBR1532混合，最终体积为20μL。在冰上预孵育15分钟后，加入20μL反应混合物，通过将管转移至37℃开始反应。反应混合物中的最终浓度为25mM Tris-Cl（pH8.3），1mM MgCl 2,1mM EGTA，1mM dATP，1mM dTTP，6.3μM冷dGTP，15μCi[α-32P] dGTP（3000 Ci） / mmol; NEN），1.25mM亚精胺，10单位RNasin，5mM 2-巯基乙醇和2.5μMTS-引物（5'-AATCCGTCGAGCAGAGTT）。对于重组酶，测定1-7μL亲和纯化的端粒酶（含有少于0.025μMhTERT），最终体积为40μL，含有50 mM Tris乙酸盐（pH 8.5），50 mM KCl，1 mM MgCl 2,1 mM亚精胺，5mM 2-巯基乙醇，1mM dATP，1mM dTTP，2.5μMdGTP，15μCi[α-32P] dGTP（3000Ci / mmol）和2.5μM（TTAGGG）3。通过在37℃温育2小时开始反应，并通过加入50μLRNase混合物（0.1mg / mL RNaseA-100u / mL RNaseT1在10mM Tris-Cl（pH8.3）和20mm EDTA中）终止反应。在37℃下孵育20分钟。通过在10mM Tris-Cl（pH 8.3）和0.5％w / v SDS中加入50μL0.3mg/ m蛋白酶K，使样品脱蛋白，在37℃温育30分钟。通过苯酚提取和乙醇沉淀回收DNA，并在8％（内源性端粒酶）或12％（重组端粒酶）聚丙烯酰胺 - 尿素凝胶上分析延伸产物。将干燥的凝胶暴露于柯达磷光成像仪屏幕，并分析结果。

[细胞实验]

将细胞一式三份涂布在具有不同浓度的BIBR1532的完全RPMI 1640培养基中。 24至72小时后，加入水溶性四唑（WST-1），通过线粒体还原酶系统转化为甲..活细胞数量的增加导致线粒体脱氢酶活性的增加，导致形成的甲dye染料的增加，其在孵育2,3和4小时后通过ELISA读数器定量。

[参考文献]

[1]. Pascolo E, et al. Mechanism of human telomerase inhibition by BIBR1532, a synthetic, non-nucleosidic drug candidate. J Biol Chem. 2002 May 3;277(18):15566-72.

[2]. El-Daly H, et al. Selective cytotoxicity and telomere damage in leukemia cells using the telomerase inhibitor BIBR1532. Blood. 2005 Feb 15;105(4):1742-9.

[3]. Ward RJ, et al. Pharmacological telomerase inhibition can sensitize drug-resistant and drug-sensitive cells to chemotherapeutic treatment. Mol Pharmacol. 2005 Sep;68(3):779-86.

[4]. R?th A, et al. Short telomeres and high telomerase activity in T-cell prolymphocytic leukemia. Leukemia. 2007 Dec;21(12):2456-62.

[5]. Meng E, et al. Targeted inhibition of telomerase activity combined with chemotherapy demonstrates synergy in eliminating ovarian cancer spheroid-forming cells. Gynecol Oncol. 2012 Mar;124(3):598-605.

[相关活性小分子]

360 A 碘化物 | 端粒酶-IN-1