四甲基罗丹明甲酯(TMRM)

TMRM 是一种细胞渗透性阳离子亲脂性红色荧光染料 (λex=530 nm, λem=592 nm)。

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染料试剂

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TMRM是荧光探针(激发,530±21nm;发射,592±22nm)。存在番红花素或TMRM时的荧光信号在加入谷氨酸后显示略微降低,表明线粒体内膜的极化增加。在存在TMRM(2μM)的情况下,与复合物I底物或加入复合物II底物的偶联呼吸减少了27％[1]。将海马培养物暴露于低浓度TMRM(50至500nM)1至3小时导致神经元和潜在神经胶质细胞中线粒体的选择性染色。将海马培养物暴露于高浓度的TMRM(1至25μM),选择性且快速地染色线粒体,在5至10分钟后达到平台期。低浓度的TMRM(50至200 nM)不会诱导细胞凋亡,而较高浓度(0.5和2.5μM)会增强细胞凋亡(KD = 500 nM)[2]。

将培养物暴露于含有TMRM和/或药物的Millipore过滤溶液（0.22μm）在37℃下1小时（除了涉及暴露于TMRM的不同持续时间的实验外）。处理后，除去溶液并在无菌条件下重新施用生长培养基，并将培养物在37℃下后孵育18小时（实验涉及暴露后不同时间点的分析）。然后将细胞在室温下用2mg / mL双苯甲酰亚胺染色20分钟。随后用盐水洗涤盖玻片并使用2P显微镜成像。在UV激发下，凋亡细胞被鉴定为明亮的荧光核，表明DNA片段化。细胞存活率计算为每次处理的5个显微镜视野中活的未染色细胞的百分比（±SD）[1]。

[1]. Chowdhury SR, et al. Simultaneous evaluation of substrate-dependent oxygen consumption rates and mitochondrial membrane potential by TMRM and safranin in cortical mitochondria. Biosci Rep. 2015 Dec 8;36(1):e00286.

[2]. Monteith A, et al. Imaging of mitochondrial and non-mitochondrial responses in cultured rat hippocampal neurons exposed to micromolar concentrations of TMRM. PLoS One. 2013;8(3):e58059.

磺丁基-β-环糊精钠盐 | 环孢霉素A | 2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-氧杂蒽-9-基)苯甲酸 | 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐 | GW4869 | 乙莫克舍 | (2R,2'R,3R,3'R,4S,4'S,5R,5'R,6S,6'S)-6,6'-硫代双(4-(4-(3-氟苯基)-1H-1,-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3,5-二醇) | Mitoquinone甲磺酸盐 | GSK2795039 | CBIC2 | BAPTA-AM | AP20187 | GKT137831 | D-(-)-荧光素 | 单响尾蛇毒蛋白