对于氨基-羟基蒽醌类化合物，红外光谱的判别价值体现在三个层面：羰基螯合状态、氢键供体受体的相对位置、以及芳环剩余C-H的面外弯曲振动模式。2-氨基-3-羟基蒽醌（CAS 117-77-1）的取代基位于同一苯环的相邻位置，且均不处于蒽醌母体的1位或4位，这一结构特征在其红外光谱中留下了一组可与其他位置异构体明确区分的强诊断信号。
一、羰基伸缩振动区（1800–1600 cm⁻¹）：判别α位取代的关键
蒽醌母核的9,10位两个羰基存在振动偶合，在红外光谱中给出两条特征吸收带。未取代蒽醌的羰基伸缩振动位于约1675 cm⁻¹（强）与1632 cm⁻¹（中）。当氨基或羟基进入1位或4位时，取代基中的N-H或O-H能够与相邻的羰基氧形成分子内六元环螯合氢键，使该羰基的π键极化增强，力常数下降。以1-氨基-2-羟基蒽醌为例，9位羰基与1位氨基形成N-H···O=C螯合，其高波数C=O吸收降至1650 cm⁻¹以下，低波数带下移至1620 cm⁻¹附近，且低波数峰的相对强度明显增大。
2-氨基-3-羟基蒽醌不存在这种螯合条件。其2位氨基与3位羟基均位于远离羰基的β位，两个C=O保持相近的电子环境，所以羰基伸缩振动仍表现为尖锐的偶合双峰，典型位置为1673 cm⁻¹与1634 cm⁻¹。与1位取代异构体相比，该化合物的羰基高波数峰不发生红移，两峰间距窄且峰形对称。这是从红外光谱上排除1位或4位取代异构体的首要依据。
二、O-H与N-H伸缩振动区（3600–3100 cm⁻¹）：反映氢键受力差异
2-氨基-3-羟基蒽醌的3位羟基与2位氨基处于邻位，羟基氢与氨基氮可形成分子内O-H···N氢键。由于N原子作为氢键受体的能力较强，该氢键使游离羟基在约3605 cm⁻¹处的尖锐伸缩峰完全消失，转而出现中心位于3280 cm⁻¹附近的宽吸收带。与此同时，伯氨基的不对称与对称伸缩振动仍保持清晰可辨：νₐₛ(NH₂)在3430 cm⁻¹，νₛ(NH₂)在3340 cm⁻¹，两峰间隔约为90 cm⁻¹。这一峰形组合说明氨基没有与羰基螯合，而是以邻位O-H···N氢键参与体系。
当异构体将氨基置于1位，例如1-氨基-2-羟基蒽醌时，氨基的N-H与9位羰基形成分子内氢键。此时伯氨基的伸缩振动峰整体下移，νₐₛ(NH₂)降至约3370 cm⁻¹，νₛ(NH₂)降至约3270 cm⁻¹，双峰间隔收窄至70 cm⁻¹，同时峰形变宽。若异构体的羟基在1位，如1-羟基-2-氨基蒽醌，O-H与10位羰基形成更强的O-H···O=C氢键，ν(O-H)会宽泛地出现在3100 cm⁻¹以下，且3600 cm⁻¹以上无残余吸收。因此，通过分析氢键作用后O-H和N-H峰的位置、宽度与双峰间距，可以准确判断取代基是否位于羰基α位。
三、指纹区C-H面外弯曲振动（900–650 cm⁻¹）：确定取代基的环上排列
蒽醌二取代物的苯环上保留C-H的个数与相对关系完全取决于取代位置。2-氨基-3-羟基蒽醌所在的外侧环共四个可取代碳，其中2位与3位被占据，剩余1位和4位的两个氢彼此位于对位，且各自邻位均为取代基或稠合碳，不存在相邻的C-H对。这一构型在指纹区给出单一且尖锐的孤立C-H面外弯曲振动峰，出现在约875 cm⁻¹。在750 cm⁻¹附近没有吸收，这排除了任何含有相邻C-H结构的异构体。
对照典型位置异构体：1-氨基-2-羟基蒽醌中剩余3位与4位氢，二者直接相邻，因此在约770 cm⁻¹产生强吸收；1-氨基-4-羟基蒽醌中剩余2位与3位相邻氢，也在约765 cm⁻¹出现特征峰；1-氨基-3-羟基蒽醌中剩余2位与4位两个不等价孤立氢，分别在约880 cm⁻¹与830 cm⁻¹给出两个独立峰。即便某些异构体同样没有1位或4位取代，比如2-氨基-6-羟基蒽醌，其两个取代基分处于不同苯环，则两个环上的剩余C-H分布完全不同，会在指纹区出现两个以上中等强度的C-H弯曲峰，而不会呈现在875 cm⁻¹单峰且在750 cm⁻¹无吸收的组合。因此指纹区能够对2,3-二取代结构给出唯一确认。
四、辅助判别信号：C-O与C-N伸缩振动
2-氨基-3-羟基蒽醌的酚羟基在1265 cm⁻¹附近的C-O伸缩振动峰保持稳定，芳胺的C-N伸缩振动则在1315 cm⁻¹出现中等强度吸收。若羟基位于1位并与羰基形成分子内氢键，则C-O伸缩振动会红移至约1240 cm⁻¹，且峰形明显变宽；若氨基位于1位，则C-N伸缩振动与N-H弯曲振动偶合加剧，在1300 cm⁻¹以上的峰强度降低并发生位移。该区域可作旁证，但需排除其他光谱重叠，通常不作为第一判别依据。
五、三区联用的鉴别逻辑
实际鉴定中应依照以下顺序读取光谱。首先观察羰基区：2-氨基-3-羟基蒽醌在1670 cm⁻¹以上保持主羰基吸收峰，而任何在1位或4位带有羟基或氨基的异构体都会使该主峰降至1650 cm⁻¹以下。其次检查氢键区：目标化合物的O-H宽峰位于3280 cm⁻¹而N-H双峰位于3430与3340 cm⁻¹，这一组合说明羟基参与O-H···N氢键，氨基不参与羰基螯合。最后分析指纹区：875 cm⁻¹孤立C-H强峰与750 cm⁻¹邻位C-H吸收缺失的组合，排除了1,2-、1,3-、1,4-以及跨环二取代的所有可能性。三个波数区域的诊断信息互相印证，可对2-氨基-3-羟基蒽醌与其全部位置异构体作出确定性区分。