| 描述 |
FR194738 free base 是一种角鲨烯环氧化酶 (squalene epoxidase) 抑制剂。在 HepG2 细胞匀浆中, FR194738 抑制角鲨烯环氧酶活性,IC50 值为 9.8 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 9.8 nM (squalene epoxidase, in HepG2 cell homogenates)[1]
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| 体外研究 |
在完整的HepG2细胞中,FR194738浓度依赖性地抑制[14 C]乙酸盐掺入游离胆固醇和胆固醇酯中,IC50分别为4.9和8.0nM。 FR194738诱导细胞内[14 C]角鲨烯积累。 FR194738增加了[14C]乙酸盐向角鲨烯的掺入,角鲨烯是胆固醇合成的中间体[1]。 FR194738有效抑制狗和大鼠中HepG2细胞匀浆和肝微粒体中的角鲨烯环氧酶(SE)。检测了FR194738与HMG-CoA还原酶抑制剂,辛伐他汀,氟伐他汀和普伐他汀相比对HepG2细胞中胆固醇生物合成的抑制作用。在这些化合物中,FR194738是最有效的,IC50为2.1 nM。辛伐他汀,氟伐他汀和普伐他汀的IC50分别为40,28和5100 nM [2]。 FR194738以浓度依赖性方式抑制仓鼠肝微粒体角鲨烯环氧酶活性,IC50为14 nM [3]。
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| 体内研究 |
测量每日施用FR194738和普伐他汀10天后仓鼠中的血清脂质水平。 FR194738降低总血清,非高密度脂蛋白(HDL)和HDL胆固醇以及甘油三酯的血清水平。与对照组相比,用FR194738处理仓鼠使HMG-CoA还原酶活性在32mg/kg时增加1.3倍,并且在100mg/kg时没有显着改变[3]。
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| 细胞实验 |
HepG2细胞在225cm 2培养瓶中生长，并在含有10％人脂蛋白缺乏血清和1μML-654,969的培养基A中孵育18小时，以增加其角鲨烯环氧酶活性。洗涤HepG2细胞并通过胰蛋白酶处理收获。离心（1000×g，4℃下5分钟）后，通过抽吸除去上清液部分。将细胞沉淀冷冻并保持在-80℃直至使用。在实验当天，将储存的细胞沉淀解冻，在含有1mM EDTA的0.1M Tris-HCl，pH7.5中超声处理（在4℃下5秒）破裂，与四分之一体积的2％Triton X混合-100℃，在4℃下放置30分钟，并通过一些修改测定角鲨烯环氧酶活性。将等分试样的混合物在37℃下孵育90分钟，使用或不使用溶于DMSO的测试化合物（FR194738; 0.01nM，0.1nM，1nM，10nM，100nM，1μM和10μM）（最终1％） ）最终体积为0.3 mL，含有0.1 M Tris-HCl，pH 7.5,1 mM EDTA，1 mM NADPH，0.1 mM FAD，0.3 mM AMO1618,2,3-氧化角鲨烯环化酶抑制剂，0.17％Triton X-100将8μM[3H]角鲨烯（3.7kBq）分散在0.075％吐温80中。通过加入0.3mL 10％乙醇KOH终止反应。在75℃温育90分钟后，用2mL石油醚萃取不可皂化的物质。萃取液在氮气流下蒸发。将残余物溶于少量二乙醚中，点在硅胶薄层色谱（TLC）板上，在苯/乙酸乙酯（99.5：0.5，v / v）中显色[1]。
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| 动物实验 |
仓鼠[3]使用6周龄的雄性金色叙利亚仓鼠（70-110克）。药物作为饮食混合物给药10天。在乙醚麻醉下通过心脏穿刺收集血液样品，并通过离心制备血清。饮食中0.32％的剂量分别对应于FR194738和普伐他汀的127和116mg / kg / d，根据体重和食物摄入量计算。
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| 参考文献 |
[1]. Sawada M, et al. Effect of FR194738, a potent inhibitor of squalene epoxidase, on cholesterol metabolism in HepG2 cells. Eur J Pharmacol. 2001 Nov 9;431(1):11-6. [2]. Sawada M, et al. Synthesis and biological activity of a novel squalene epoxidase inhibitor, FR194738. Bioorg Med Chem Lett. 2004 Feb 9;14(3):633-7. [3]. Sawada M, et al. Inhibition of cholesterol synthesis causes both hypercholesterolemia and hypocholesterolemia in hamsters. Biol Pharm Bull. 2002 Dec;25(12):1577-82.
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