| 描述 |
PGMI-004A 是一种有效的磷酸甘油酸变位酶 1 (PGAM1) 抑制剂,IC50 为 13.1 μM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 13.1 μM (PGAM1)[1]
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| 体外研究 |
PGMI-004A以约13.1μM的IC 50抑制PGAM1,并且基于荧光的结合测定确定PGMI-004A-PGAM1相互作用的Kd值为7.2±0.7μM。 PGMI-004A可以变构调节PGAM1的酶活性。使用Dixon图分析确定Ki值为3.91±2.50μM。蛋白质-配体相互作用的Kd值计算为9.4±2.0μM。 PGMI-004A(20μM)处理对PGAM1活性的抑制导致H1299细胞中2-PG和3-PG水平降低,这可以通过用甲基-2-PG处理来挽救。用PGMI-004A(20μM)处理导致乳酸产生显着降低,其通过甲基-2-PG处理挽救,但对细胞内ATP水平没有显着影响。 PGMI-004A(20μM)处理导致氧化PPP通量和NADPH/NADP +比率降低,以及H1299细胞中脂质和RNA的生物合成减少以及细胞增殖。 PGMI-004A处理导致多种人类癌症和白血病细胞的细胞增殖减少,但不能控制人真皮成纤维细胞(HDF),人类包皮成纤维细胞(HFF),人类HaCaT角质形成细胞和人黑素细胞PIG1细胞,表明最小的非特异性毒性PGMI-004A在正常,增殖的人类细胞中的作用[1]。
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| 体内研究 |
通过将H1299细胞注射到裸鼠中进行异种移植实验。注射后6天,将小鼠分成两组(n = 8 /组)并用PGMI-004A(100mg/kg /天)或载体处理21天。与接受载体对照的小鼠相比,PGMI-004A治疗导致治疗小鼠中肿瘤生长和肿瘤大小显着降低。此外,用PGMI-004A处理可有效抑制异种移植裸鼠切除肿瘤中体内肿瘤中的PGAM1酶活性[1]。
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| 细胞实验 |
对于贴壁细胞活力测定，例如具有台盼蓝排除的H1299细胞，在测定开始前24小时将5×10 4个细胞接种在6孔板中并在37℃下培养。接种后24小时，用PGMI-004A（5,10,20和40μM）处理细胞，并在37℃下孵育指定的时间。通过计数药物处理的细胞来确定细胞活力，与在显微镜下用台盼蓝排除的DMSO处理的对照细胞相比（×40）。对于粘附细胞的MTT细胞活力测定，在测定开始前24小时将5×103细胞接种在96孔板中并在37℃下培养。接种后24小时，用PGMI-004A处理细胞，并在37℃下培养3天。通过使用CellTiter96Aqueous One溶液增殖试剂盒[1]测定细胞活力。
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| 动物实验 |
小鼠[1]裸鼠（雌性6-8周龄）皮下注射左侧含有空载体的10×106 H1299细胞，右侧侧壁内源性hPGAM1稳定敲低的细胞。收获肿瘤并在实验终点称重，并比较来自在每只小鼠的两侧中具有和不具有稳定敲低内源性hPGAM1的细胞的肿瘤的质量（g）。通过与对照组相比较的双尾配对Student's ttest进行统计学分析。对于使用异种移植小鼠的PGMI-004A的药物评价，在每只小鼠右侧皮下注射H1299细胞后6天，通过每日ip注射以100mg / kg的剂量给予PGMI-004A。通过在3周疗程中测量肿瘤的两个垂直直径来记录肿瘤生长[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Hitosugi T, et al. Phosphoglycerate mutase 1 coordinates glycolysis and biosynthesis to promote tumor growth. Cancer Cell. 2012 Nov 13;22(5):585-600.
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