1241537-79-0

• 常用中文名：E260
• 常用英文名：E260
• CAS号：1241537-79-0
• 分子式：C₂₄H₃₄N₆S
• 分子量：438.63
• 相关类别： 研究领域 癌症
• 发布时间：2018-03-10 18:37:11
• 更新时间：2025-08-26 05:51:55
• E260 是一种 Fer/FerT 激酶抑制剂。

名称

• 中文名: E260
• 英文名: E260

物化性质

• 分子式: C₂₄H₃₄N₆S
• 分子量: 438.63
• 外观性状: 白色固体
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: E260 是一种 Fer/FerT 激酶抑制剂。
• 相关类别:
  信号通路 >> 其他 >> 其他
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  Fer/FerT kinase[1]

• 体外研究: E260是Fer和FerT抑制剂,其通过施加线粒体功能障碍和变形以及能量自噬的开始选择性地引起癌细胞中的代谢应激,其降低细胞ATP水平。为了证明E260直接靶向Fer和FerT,使用这些酶的纯化的含激酶结构域(KD)的片段进行体外激酶测定。该分析证明了E260对该结构域的直接抑制作用,如通过与ATP孵育和增加E260浓度时Fer/FerT KD的自身磷酸化水平显着降低所反映的。此外,在模拟的整个Fer蛋白中E260对接的计算分析显示,E260与Fer的最高得分结合模式落在酶KD的ATP结合口袋中。为了测量来自Fer/FerT KD的E260的解离常数(Kd),使用递增浓度的E260进行微尺度热泳(MST)测试。该分析证实了E260与Fer/FerT KD的直接结合,并确定Kd为0.85μM。为了检查E260胶束制剂对恶性细胞中Fer的影响,将激酶从未处理的和来自E260处理的SW620 CC细胞中免疫沉淀。当应用于血清饥饿16小时并用3mM H 2 O 2处理以激活Fer的转移性IV级SW620 CC细胞时,E260表现出对Fer激酶活性的抑制作用,这通过抑制酶的自身磷酸化活性来反映。为了表征E260对恶性细胞的作用,用E260处理转移性SW620细胞,然后分析存活力。在E260处理的细胞中观察到死亡,在处理24小时后EC50值为400nM,48小时后EC50为300nM。 E260在非转移性PANC-1细胞处理72小时后表现出3.2μM的EC50,所述非转移性PANC-1细胞源自原发性胰腺导管癌。此外,用4μME260处理后,用E260处理72小时后这些细胞的最大死亡水平为约70％。相比之下,SU.86.86是转移性导管癌细胞,经证实对E260更敏感,治疗72小时后EC50为1.1μM,2μME260施加100％死亡水平[1]。
• 体内研究: E260抑制体内异种移植物进展。在小鼠中测定E260的药代动力学(PK)谱。 E260在血液中显示T1/2为175分钟,并且分布体积为4244mL/kg,表明化合物在动物组织中的有效分布。为了评估E260对肿瘤生长的功效,将SW620细胞皮下引入免疫受损的“裸鼠”小鼠中。 E260的施用导致整个实验中肿瘤进展的显着减弱,并且在治疗22天后平均肿瘤体积减少10倍。为了进一步证明体内E260的抗癌活性,用E260处理携带SW48细胞的异种移植物的小鼠并测定肿瘤进展谱。与对照治疗组相比,用E260治疗的小鼠在肿瘤进展中表现出5-6倍的减弱[1]。
• 激酶实验: 为了测试E260对Fer / FerT KD自身磷酸化活性的影响，将0.5μgFer/ FerT KD蛋白在0.5 mL激酶活性缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5,10 mM MgCl 2,1 mM EGTA，0.01）中孵育。 ％Brij-35）和1μMATP。作为阴性对照，将KD蛋白在不含ATP的相同缓冲液中温育。将含有KD和ATP的混合物在室温下孵育1小时，其中溶解在DMSO中的浓度升高的E260或仅用DMSO。孵育期后，通过SDS-PAGE分离来自孵育的混合物的样品，并使用特异性抗-Fo和抗-pY抗体进行WB分析以评估E260的抑制作用，如通过降低的磷酸化水平所反映的。 Fer / FerT KD [1]。
• 细胞实验: 使用MultiTox-Fluor Multiplex Cytotoxicity Assay测定细胞死亡水平。简而言之，将SW620 CC细胞接种到黑色96孔板中。 24小时后，当细胞完全附着时，以不同浓度施用2μME260或对照溶液并孵育所需的一段时间。孵育期后，将用于测定细胞死亡水平的测定荧光团加入每个孔中。使用ELISA读数器测定来自每个孔的荧光团发射的相对荧光强度，并将其与从绘制的标准曲线获得的荧光强度进行比较，以将其转化为细胞死亡百分比，并归一化至未处理的细胞，其也用于每次分析[1]。
• 动物实验: 小鼠[1]裸鼠接种1.5×106 SW620或SW48 CC细胞，随机分成实验组。在接种前2天将小鼠从随意饮食转移到更严格的饮食以降低血糖水平。此时，每笼饲养一只小鼠，以确保均匀食用。饮食由3克/小鼠/天的标准食物组成，每天同时给予。食物在平均2小时内消耗，因此小鼠在接下来的22小时内保持无食物直至每日口粮。在整个实验过程中，小鼠保持这种饮食。在肿瘤接种后4天将小鼠随机化并再次置于笼中。用25或50mg / kg的胶束E260制剂每12小时腹膜内注射小鼠22天，对照小鼠注射空胶束[1]。
• 参考文献:

  [1]. Elkis Y, et al. A novel Fer/FerT targeting compound selectively evokes metabolic stress and necrotic death in malignant cells. Nat Commun. 2017 Oct 16;8(1):940.