| 描述 |
NVS-PAK1-1是有效,选择性的 PAK1 变构抑制剂,IC50值为5 nM。
|
| 相关类别 |
|
| 靶点 |
IC50: 5 nM (PAK1)[1]
|
| 体外研究 |
与一般的其他PAK同种型和激酶组相比,NVS-PAK1-1对PAK1的抑制具有高选择性。 NVS-PAK1-1的生化PAK1 Kd为7 nM,PAK2 Kd为400 nM。 NVS-PAK1-1在生化分析中表现出优异的活性,并且对其他已知的激酶具有出色的选择性。 6-20μM的NVS-PAK1-1抑制下游底物MEK1 Ser289的磷酸化。与观察结果一致,NVS-PAK1-1仅在高于2μM的浓度下抑制Su86.86细胞系的增殖。相反,通过应用NVS-PAK1-1和PAK2 shRNA的混合物,实现了在显着更低的0.21μM浓度下对下游信号传导和细胞增殖的抑制[1]。
|
| 体内研究 |
NVS-PAK1-1在大鼠肝微粒体(RLM)中显示出相对较差的稳定性,这将限制其在体内研究中的应用(RLM 3.5分钟内t1/2)[1]。
|
| 激酶实验 |
使用Caliper测定法测量PAK1激酶活性的抑制。使用384孔微量滴定板进行测定。化合物（NVS-PAK1-1）作为8点剂量反应进行测试。通过将50nL化合物溶液在90％DMSO中直接加入空板中来制备测定。随后，将4.5μL酶溶液加入每个孔中，并将所得溶液在30℃下预温育60分钟，然后加入4.5μL肽/ ATP溶液。在30℃温育60分钟后，通过每孔加入16μL终止溶液终止反应。将具有终止激酶反应的平板转移至Caliper LC3000工作站进行读数。在微流体迁移率变动分析中测量产物形成。 IC50值来自不同化合物浓度下的抑制百分比值，通过非线性回归分析[1]。
|
| 参考文献 |
[1]. Karpov AS, et al. Optimization of a Dibenzodiazepine Hit to a Potent and Selective Allosteric PAK1 Inhibitor. ACS Med Chem Lett. 2015 May 22;6(7):776-81.
|
