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  • 常用中文名:OABK盐酸盐
  • 常用英文名:OABK hydrochloride
  • CAS号:1984862-48-7
  • 分子式:C14H20ClN5O4
  • 分子量:357.79
  • 相关类别: 研究领域 其他
  • 发布时间:2018-05-03 21:41:13
  • 更新时间:2025-08-25 12:24:39
  • OABK hydrochloride 是一种小分子开关,可用于控制蛋白质活性。

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中文名 OABK盐酸盐
英文名 OABK (hydrochloride)
描述 OABK hydrochloride 是一种小分子开关,可用于控制蛋白质活性。
相关类别
体外研究 一种小分子开关,通过邻位-叠氮基苄氧基羰基赖氨酸(OABK)的位点特异性掺入来激活蛋白质功能。氨基酸OABK由2-叠氮基苄醇通过琥珀酰亚胺基碳酸酯在三步中容易地合成。脱保护导致赖氨酸的形成,并且当OABK掺入蛋白质时,形成活性野生型蛋白质。遗传编码的OABK与小分子活化相结合,允许细胞内蛋白质成熟的条件调节。在EGFP的K85位掺入OABK(0.5mM)抑制荧光团形成,直到通过小分子激活产生天然赖氨酸(该模型基于蛋白质数据库(PDB)。在K206位置引入OABK通过限制来抑制FLuc酶活性。三磷酸腺苷(ATP)进入活性位点,直至酶去保护并通过磷化处理活化。在没有小分子活化的情况下,OABK掺入FLuc阻断荧光素酶活性,由Bright-Glo测定荧光素酶测定[1]。
细胞实验 将HEK293T细胞以每孔100,000个细胞(400μL)接种到聚-D-赖氨酸包被的八孔室载玻片中。在75%汇合时,使用线性PEI(3μL,0.323mg / mL)将细胞与pEGFP-K85TAG-mCherry或pEGFP-K29TAG-SatB1-mCherry和pOABKRS-4PylT(每种质粒200ng)共转染。在OABK(0.25mM)存在下,在含有10%FBS的DMEM中于37℃和5%CO 2温育20小时后,用不含酚红的DMEM(200μL)洗涤细胞三次,然后洗涤三次。孵育几小时以去除任何未掺入的OABK。在小分子激活之前,使用德克萨斯红色通道聚焦细胞,并使用Nikon A1共聚焦显微镜(×40油物镜,×2变焦,异硫氰酸荧光素(ex = 488 nm)和德克萨斯红(ex = 560 nm)成像) )频道)[1]。
参考文献

[1]. Luo J, et al. Small-molecule control of protein function through Staudinger reduction. Nat Chem. 2016 Nov;8(11):1027-1034.

分子式 C14H20ClN5O4
分子量 357.79
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