PK11007

PK11007 是具有抗癌活性的温和硫醇烷基化剂。PK11007 通过两个表面暴露的半胱氨酸的选择性烷基化来稳定 p53,而不影响其 DNA 结合活性。PK11007 通过增加活性氧 (ROS) 水平诱导突变的 p53 癌细胞死亡。

研究领域 >> 癌症

信号通路 >> 细胞凋亡 >> MDM-2/p53

PK11007(0-120μM；24小时；4种p53野生型细胞系和4种p53突变细胞系)处理导致突变型p53细胞系MKN1(V143A),HUH-7(Y220C),NUGC-3的大量活力降低。(Y220C)和SW480(R273H/P309S),浓度范围为15至30μM.PK11007主要诱导不依赖于半胱天冬酶的细胞死亡[1]。PK11007(0-60μM；3小时或6小时；NUGC-4,NUGC-3,MKN1,HUH-6和HUH-7癌细胞)处理上调p53靶基因p21,MDM2和PUMA的蛋白质水平在NUGC-3(p53-Y220C),HUH-7(p53-Y220C)和MKN1(p53-V143A)细胞中,大多数浓度依赖性方式,表明转录活性部分恢复到不稳定的p53突变体。PK11007还增加HUH-6和NUGC-4细胞中的p53活性,如MDM2,PUMA和p21蛋白水平的增加所示[1]。PK11007(15-20μM；4.5小时或6小时；MKN1,HUH-7,NUGC-3,HUH-6细胞)处理在处理6小时后增加三种突变型p53细胞系中p53靶基因的转录。在处理NUGC-3,MKN和HUH-7细胞以及后两者的NOXA时,PUMA和p21 mRNA水平上调2倍。MKN1和NUGC-3细胞中MDM2水平减半[1]。谷胱甘肽耗竭增强PK11007活力降低。为了测试PK11007是否也增加ROS水平,将具有PK11007的NUGC-3,NUGC-4,HUH-6,HUH-7和MKN1细胞孵育2小时。2小时后所有细胞系中的ROS水平均升高。然而,在突变型p53细胞MKN1,HUH-7和NUGC-3中,在60μMPK11007处ROS增加高于NUGC-4和HUH-6细胞,表明突变型p53细胞系的较高PK11007敏感性是由较强的ROS诱导介导的。MKN1细胞中基础和PK11007诱导的ROS水平至少比其他细胞系高两倍[1]。PK11007抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡并改变参与细胞死亡的基因都与PK11007重新激活突变型p53的能力一致[2]。细胞活力测定[1]细胞系：p53野生型细胞系(WI-38,HUH-6,NUGC-4,SJSA-1)和p53突变细胞系(HUH-7,NUGC-3,SW480,MKN1)浓度：0μM,20μM,40μM,60μM,80μM,100μM和120μM孵育时间：24小时结果：突变型p53细胞系MKN1(V143A)存活率大幅下降,HUH-7(Y220C),NUGC-3(Y220C)和SW480(R273H/P309S)以及浓度范围为15至30μM的p53 WT细胞系SJSA-1.p53 WT癌细胞系HUH-6,NUGC-4和WI-38仅在高浓度化合物(60和120μM)下细胞活力降低,敏感性降低。蛋白质印迹分析[1]细胞系：NUGC-4,NUGC-3,MKN1,HUH-6和HUH-7癌细胞浓度：0μM,15μM,30μM,60μM孵育时间：3小时或6小时结果：在NUGC-3(p53-Y220C)中以主要浓度依赖性方式上调p53靶基因p21,MDM2和PUMA的蛋白质水平,HUH-7(p53-Y220C)和MKN1(p53-V143A)细胞。还增加了HUH-6和NUGC-4细胞中的p53活性,如MDM2,PUMA和p21蛋白水平的增加所示。RT-PCR[1]细胞系：MKN1,HUH-7,NUGC-3,HUH-6细胞浓度：15μM,20μM孵育时间：4.5小时或6小时结果：三种突变体中p53靶基因的转录增加p53处理6小时后的细胞系。在处理NUGC-3,MKN和HUH-7细胞以及后两者的NOXA时,PUMA和p21 mRNA水平上调2倍。MKN1和NUGC-3细胞中MDM2水平减半。

[1]. Bauer MR, et al. 2-Sulfonylpyrimidines: Mild alkylating agents with anticancer activity toward p53-compromised cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016 Sep 6;113(36):E5271-80.

[2]. Synnott NC, et al. Mutant p53 as a therapeutic target for the treatment of triple-negative breast cancer: Preclinical investigation with the anti-p53 drug, PK11007. Cancer Lett. 2018 Feb 1;414:99-106