3-甲基-N-[1,4,5,6-四氢-6,6-二甲基-5-[(1-甲基-4-哌啶基)甲酰基]吡咯并[3,4-C]吡唑-3-基]丁酰胺

用途

PHA-793887 是一种有效的,ATP 竞争性的 CDK 抑制剂,可抑制 Cdk2,Cdk1,Cdk4 和 Cdk9 的活性,IC50 值分别为 8 nM,60 nM,62 nM 和 138 nM,同时可抑制糖原合酶激酶 3β (GSK-3β),IC50 值为 79 nM。

名称

[ CAS 号 ]:
718630-59-2

[ 中文名 ]:
3-甲基-N-[1,4,5,6-四氢-6,6-二甲基-5-[(1-甲基-4-哌啶基)甲酰基]吡咯并[3,4-C]吡唑-3-基]丁酰胺

[ 英文名 ]:
PHA-793887

[英文别名 ]:

S1487_Selleck
PHA-793887

生物活性

[ 描述 ]:

[ 相关类别 ]:

研究领域 >> 癌症

[ 靶点 ]

Cdk5/p25:5 nM (IC50)

cdk2/cyclin A:8 nM (IC50)

CDK2/cyclinE:8 nM (IC50)

CDK7/cyclin H:10 nM (IC50)

Cdk1/cyclin B:60 nM (IC50)

Cdk4/cyclin D1:62 nM (IC50)

CDK9/cyclinT1:138 nM (IC50)

GSK-3β:79 nM (IC50)

[体外研究]

在A2780肿瘤细胞系中,PHA-793887部分抑制1μM的Rb磷酸化,几乎完全抑制3μM的Rb磷酸化。 PHA-793887(1μM)部分抑制A2780肿瘤细胞系中Cdk2底物Rb和NPM的磷酸化。 PHA-793887(6μM)显着抑制MCF7细胞系中的Rb和NPM磷酸化[1]。 PHA-793887在体外显示针对白血病细胞系的细胞毒活性,IC50范围为0.3至7μM。在菌落测定中,PHA-793887对白血病细胞系具有高度细胞毒性,IC50 <0.1μM。 PHA-793887诱导细胞周期停滞,抑制Rb和核磷蛋白磷酸化,并在0.2至1μM的低剂量下调节细胞周期蛋白E和cdc6表达,并在5μM的最高剂量下诱导细胞凋亡。 PHA-793887是几种cdk的新型抑制剂,包括cdk1,cdk2,cdk4,cdk5,cdk7和cdk9,IC50在5到140 nM范围内[3]。

[体内研究]

PHA-793887在CD-1裸鼠中以30mg/kg的剂量在15mg/kg至75％的剂量下诱导50％的肿瘤生长抑制。 PHA-793887(30mg/kg,iv)也诱导CD-1小鼠皮肤中58-基因组的显着下调[1]。 PHA-793887(20mg/kg,iv)在HL60模型中诱导肿瘤消退。在K562模型中,PHA-793887显着降低肿瘤生长。此外,PHA-793887(20 mg/kg,iv)在体内移植物中抑制人原发性白血病的生长[3]。

[细胞实验]

使用Alamar蓝色活体染料进行细胞毒性测定。对于每个细胞系，进行初步剂量 - 反应曲线以建立细胞浓度范围，给出与荧光的线性关系。对于细胞系，在存在或不存在增加剂量的药物（0.01-10μM）的情况下，将5,000至20,000个细胞接种在96孔板中的200μL完全培养基中。对于ALL-2和AML-PS白血病，将10×10 5个细胞/孔接种在StemSpanSFEM培养基中并用相同范围的药物浓度处理。在存在或不存在1μg/ mL植物血凝素或生长因子混合物（50ng / mL干细胞因子，每种粒细胞 - 巨噬细胞集落20ng / mL）的情况下，将外周血单核细胞和脐带血CD34 +细胞以1×10 5细胞/孔接种。 - 刺激因子，粒细胞集落刺激因子，白细胞介素-3，白细胞介素-6和3U / mL促红细胞生成素）。在所有情况下，培养48小时后，加入1/10体积的Alamar蓝溶液并孵育过夜。然后在荧光计中读取板，激发波长为535nm，发射波长为590nm。在没有细胞减去背景荧光后，将细胞毒性计算为相对于未处理对照的荧光百分比。

[动物实验]

将107个HL60和K562细胞皮下接种在SCID小鼠中。每组7只小鼠随机分配动物。 PHA-793887以20mg / kg静脉内（IV）每天一次给药，在HL60模型中持续10天（从第9天至第18天）并且具有两个5天周期（从第9天至第13天并且来自第17天至第21天）在携带K562的小鼠中。从第9天开始，在K562异种移植模型中连续9天口服施用Glivec。每周两次评估肿瘤生长和净体重。根据下式计算肿瘤重量：肿瘤重量=长度（mm）×宽度2（mm）/ 2。抗癌治疗的效果被确定为肿瘤指数生长开始的延迟。该延迟（T-C值）定义为治疗肿瘤（T）和对照组（C）达到预定大小所需的中位时间（以天计）的差异。基于体重减轻来评估毒性。

[参考文献]

[1]. Locatelli G, et al. Transcriptional analysis of an E2F gene signature as a biomarker of activity of the cyclin-dependent kinase inhibitor PHA-793887 in tumor and skin biopsies from a phase I clinical study. Mol Cancer Ther. 2010 May;9(5):1265-73.

[2]. Massard C, et al. A first in man, phase I dose-escalation study of PHA-793887, an inhibitor of multiple cyclin-dependent kinases (CDK2, 1 and 4) reveals unexpected hepatotoxicity in patients with solid tumors. Cell Cycle. 2011 Mar 15;10(6):963-70. Epub 2011 Mar 15.

[3]. Alzani R, et al. Therapeutic efficacy of the pan-cdk inhibitor PHA-793887 in vitro and in vivo in engraftment and high-burden leukemia models. Exp Hematol. 2010 Apr;38(4):259-269.e2.

[4]. Brasca MG, et al. Optimization of 6,6-dimethyl pyrrolo[3,4-c]pyrazoles: Identification of PHA-793887, a potent CDK inhibitor suitable for intravenous dosing. Bioorg Med Chem. 2010 Mar 1;18(5):1844-53.

[相关活性小分子]