FHZ

FHZ 是一个荧光探针。

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加载探针FHZ并依次用HClO和H2O2/EDTA-Fe2 +处理后,HeLa细胞显示青色和绿色通道的明亮荧光。 FHZ可以在OH和HClO存在下发出两种不同的荧光信号,表明通过具有两个激发波长的双通道检测模型同步区分•OH和HClO。探针FHZ分别对410和490 nm处的激发对OH和HClO的检测显示出非常高的特异性。探针FHZ可通过双荧光反应有效地进入细胞线粒体并显示内源性•OH和HClO的可区分/视觉能力[1]。

探针FHZ可以迅速从斑马鱼肠道吸收到血液循环系统中,并扩散整个斑马鱼组织,并在没有ROS的情况下保持其在血液,器官和组织中的稳定性。探针可以保持其在生物环境中的稳定性,并且只能选择性地与•OH和HClO物种反应[1]。

将HeLa细胞和RAW264.7巨噬细胞在含有10％胎牛血清（FBS）和1％抗生素（青霉素和链霉素）的高葡萄糖Dulbecco's改良Eagle培养基（DMEM）中于37℃在含有5％CO 2的潮湿培养箱中培养。将细胞接种到玻璃底皿中并培养24小时。随后，将细胞与FHZ在37℃温育30分钟，然后用PBS缓冲液洗涤三次。每次用H2O2，EDTA-Fe2 +，HClO或清除剂处理细胞均保持30分钟[1]。

在该研究中使用野生型斑马鱼。将7日龄受精斑马鱼胚胎在50μMFHZ中培养30分钟，然后将斑马鱼胚胎转移到淡水中。装载FHZ的斑马鱼在共聚焦显微镜下使用2％琼脂糖凝胶固定，以保持其生存状态以进行荧光成像。为了观察新鲜伤口中•OH的释放，使用刀片小心地切割FHZ装载的斑马鱼的腹鳍。在水中饲养20分钟后，使用共聚焦显微镜对损伤的斑马鱼的伤口进行成像[1]。

[1]. Zhang R, et al. Real-Time Discrimination and Versatile Profiling of Spontaneous Reactive Oxygen Species in Living Organisms with a Single Fluorescent Probe. J Am Chem Soc. 2016 Mar 23;138(11):3769-78.

磺丁基-β-环糊精钠盐 | 环孢霉素A | 2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-氧杂蒽-9-基)苯甲酸 | 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐 | GW4869 | 乙莫克舍 | (2R,2'R,3R,3'R,4S,4'S,5R,5'R,6S,6'S)-6,6'-硫代双(4-(4-(3-氟苯基)-1H-1,-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3,5-二醇) | Mitoquinone甲磺酸盐 | GSK2795039 | CBIC2 | BAPTA-AM | AP20187 | GKT137831 | D-(-)-荧光素 | 单响尾蛇毒蛋白