VPS34-IN-2

Vps34-IN-2 是一种新型的,有效且有选择性的 Vps34 抑制剂,在 Vps34 酶促测定和 GFP-FYVE 细胞测定中的 IC50 值分别为 2 和 82 nM。

研究领域 >> 癌症

Vps34:2 nM (IC50)

Vps34-IN-2(化合物31)分别在Vps34酶测定和GFP-FYVE细胞测定中显示2和82nM的IC50。 Vps34-IN-2表现出对mTOR(IC50>10μM)和I类PI3K的选择性(分别对PI3Kα,β,δ,γ同种型的IC50值分别为2.7,4.5,2.5和>10μM)[1]。

在通过静脉内(iv)途径施用后,取决于动物,Vps34-IN-2(化合物31)浓度可定量至6,8和24小时(最后取样时间)。口服给药(po)后,Vps34-IN-2迅速被吸收,在0.5小时观察到最大血浆浓度,生物利用度为85％。在口服给药后4和8小时观察到轻微的浓度反弹,没有明显的解释。静脉注射3mg/kg的Vps34-IN-2后,血浆清除率中等(即2.3L/h/kg),相当于该物种中44％的肝血流量,稳态时的分布容积为中度,终末消除半衰期短[1]。

将细胞在含有10％胎牛血清的RPMI-1640培养基中培养。通过在含有裂解缓冲液的洗涤剂中超声处理裂解细胞，并通过离心澄清，收集所得上清液用于化合物处理。裂解物的最终蛋白质浓度为4mg / mL。将5μL的Vps34-IN-2（化合物31）的量从DMSO中的100×储备溶液一式两份加入到445μL裂解物中。将一定量的5μLDMSO加入到445μL裂解物中，一式四份用于对照。孵育15分钟后，向每个样品中加入5μL100X的ATP探针I水溶液（ATP探针I的最终浓度为0.5μM）。 5分钟后，向每个样品中加入50μL的10X ATP探针II水溶液（ATP探针II的最终浓度为20μM）。然后将所有样品再孵育10分钟[1]。

对于PK / PD研究，将具有50％基质胶的3×106H1299-GFP-FYVE肿瘤细胞皮下注射到SCID小鼠的背侧，每只小鼠一个肿瘤。当异种移植肿瘤达到~200至400 mm3的范围时，用载体（98％PEG200 / 2％PS80）或单剂量的Vps34-IN-2（化合物31）以100和50mg / kg通过口服处理小鼠。灌胃。在每个时间点处死用单独的载体处理的三只小鼠和用Vps34-IN-2处理的三只小鼠;收集肿瘤组织进行免疫组织化学（IHC）分析，收集血浆样品以确定Vps34-IN-2的浓度[1]。

[1]. Pasquier B, et al. Discovery of (2S)-8-[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]-1-(3-methyl-2-oxobutyl)-2-(trifluoromethyl)-3,4-dihydro-2H-pyrimido[1,2-a]pyrimidin-6-one: a novel potent and selective inhibitor of Vps34 for the treatment of solid tumors. J Med Chem. 2015 Jan 8;58(1):376-400.

3-甲基腺嘌呤 | LY294002 | 渥曼青霉素 | Alpelisib (BYL719) | 5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺 | IPI549 | 2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺 | 艾代拉里斯 | Dactolisib (BEZ235) | 槲皮素 | SAR405 | 2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)-1-哌嗪基]甲基]-4-(4-吗啉基)噻吩并[3,2-D]嘧啶 | 740 Y-P | LY3023414 | 1,3-二咖啡酰奎宁酸