| 描述 |
ESI-09是新型非环状核苷酸EPAC的拮抗剂,抑制EPAC1 and EPAC2的IC50值分别为3.2和1.4 μM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 3.2 μM (EPAC1), 1.4 μM (EPAC2)[1]
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| 体外研究 |
虽然cAMP与8-NBD-cAMP结合竞争,IC50为39μM,但ESI-09显示出增加的效力,表观IC50为10μM。 ESI-09抑制cAMP介导的EPAC2和EPAC1 GEF活性,IC50分别为1.4和3.2μM。 ESI-09可以很好地适应EPAC1的功能性cAMP结合口袋,与蛋白质的活性位点残基建立有利的疏水和氢键相互作用。 ESI-09以剂量依赖性方式抑制T308和S473处的007-AM刺激的Akt磷酸化。 ESI-09抑制胰腺癌细胞AsPC-1和PANC-1迁移。 ESI-09抑制EPAC1介导的PDA细胞对胶原蛋白I的粘附[1]。暴露于ESI-09显着降低了感染后30分钟HUVEC中的细胞内和细菌总数,其中10个多重感染(MOI)的R. australis与相似感染的对照相比[2]。
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| 体内研究 |
用ESI-09处理显着保护WT小鼠免受R. australis感染,具有更轻微的疾病表现并显着提高存活率[2]。
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| 细胞实验 |
将INS-1细胞接种在预先涂有聚赖氨酸的96孔板中。孵育过夜后，用含有2.9mM葡萄糖的Krebs-Ringer碳酸氢盐（KRB）替换培养基。再孵育2小时后，将细胞用ESI-09或DMSO载体作为对照，在含有11.8mM葡萄糖的新鲜KRB中处理10分钟，然后用10μM007-AM刺激30分钟。收集上清液，并使用来自Crystal Chem Inc的超敏感大鼠胰岛素ELISA试剂盒定量胰岛素[1]。
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| 动物实验 |
小鼠：将ESI-09溶解在含有10％（体积/体积）乙醇和10％（体积/体积）吐温-80的缓冲盐水中。将33只WT C57BL / 6小鼠分成4组[11只小鼠（A组），10只小鼠（B组），每只6只小鼠（C组和D组）]。在感染前通过ip注射用Epac特异性抑制剂ESI-09 [10mg / kg]处理组A和C 5天，而用载体处理组B和D，然后静脉内接种R. australis用于组C组和D组的A和B或模拟接种.ESI-09或载体处理再持续7天，直到第8天小鼠被杀死。在实验过程中，每天监测动物的疾病和死亡迹象[ 2]。
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| 参考文献 |
[1]. Almahariq M, et al. A novel EPAC-specific inhibitor suppresses pancreatic cancer cell migration and invasion. Mol Pharmacol. 2013 Jan;83(1):122-8. [2]. Gong B, et al. Exchange protein directly activated by cAMP plays a critical role in bacterial invasion during fatal rickettsioses. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Nov 26;110(48):19615-20.
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