描述 |
SAG 是一种有效的 Smo 受体 激动剂,能够活化 Hedgehog 信号通路,Kd 值为 59 nM。
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相关类别 |
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靶点 |
Kd: 59 nM (Smo)[1]
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体外研究 |
SAG在Hh途径中作用于Ptch1的下游并抵消Smo的环巴胺抑制。 SAG在Shh-LIGHT2细胞中诱导萤火虫荧光素酶表达,EC50为3nM,然后在较高浓度下抑制表达。在表达Smo的Cos-1细胞中,SAG对SAG/Smo复合物产生59nM的表观解离常数(KD)[1]。由于Smo在Shh/Ptc1下游起作用,SAG和purmorphamine可以抑制机器人的抑制作用[2]。
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体内研究 |
在CD-1小鼠中,单独的SAG(1.0mM)或NELL-1(600μg/ ml)导致在第4周和第8周时骨形成增加,但是两种组分组合(SAG + NELL-1)显着更大的骨形成。两种化合物的组合显示出新骨形成的显着增加,伴随着缺血性血管形成的增加[3]。 SAG(15,17或20mg/kg,ip)诱导前轴多指畸形。最高的SAG剂量在约1%时有效。 80%的胚胎和肢体芽中Gli1和Gli2 mRNA的表达增加,Gli1 mRNA的表达上调最多[4]。
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动物实验 |
GD 9:6小时雌性称重,给予单次腹膜内SAG注射(分别为15,17和20mg / kg剂量分别为6,6和7)或载体(乳酸林格氏溶液; 9窝),并返回到他们的家笼。 GD 9:6是通过视黄酸和乙醇给药诱导前肢畸形的敏感期。对于SAG剂量反应研究,收集GD15胚胎,检查每个肢体上的数字的数量和外观。对于整体原位杂交研究,在冰冷的无RNase磷酸盐缓冲盐水(PBS)中于9:10小时收集胚胎,在4%多聚甲醛中固定,用PBS冲洗,在甲醇中脱水并储存于 - 20℃。
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参考文献 |
[1]. Chen JK, et al. Small molecule modulation of Smoothened activity. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002 Oct 29;99(22):14071-6. [2]. Stanton BZ, et al. A small molecule that binds Hedgehog and blocks its signaling in human cells. Nat Chem Biol. 2009 Mar;5(3):154-6. [3]. Lee S, et al. Combining Smoothened Agonist (SAG) and NEL-like protein-1 (NELL-1) Enhances Bone Healing. Plast Reconstr Surg. 2017 Feb 13 [4]. Fish EW, et al. Preaxial polydactyly following early gestational exposure to the smoothened agonist, SAG, in C57BL/6J mice. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 2016 Nov 1
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