| 描述 |
MIM-1 是一种骨髓细胞因子 1 (Mcl-1) 抑制剂。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Mcl-1
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| 体外研究 |
MIM-1选择性地靶向Mcl-1的BH3结合沟,具有Bak依赖性细胞凋亡活性。为了估计HA和T98G细胞对凋亡抑制剂MIM-1的敏感性,比色MTT测定法用于检测细胞活力并确定IC 50值。与MIM-1抑制剂处理后的T98G细胞系(80.20μM)的IC50相比,HA细胞系的IC50值几乎低5倍(16.10μM)。
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| 细胞实验 |
对于人星形胶质细胞（HA）和人GB（T98G）细胞系，分别测定凋亡抑制剂ABT-737和MIM-1的IC50值，定义为使细胞总体生长减少50％的浓度。 。根据初步实验，通过实验选择凋亡抑制剂浓度和处理时间段。最终的ABT-737处理在浓度为10倍的情况下进行，浓度范围为0.001-100μM，最终的MIM-1处理浓度为4倍，浓度范围为0.4-400μM，持续48小时。 。基于MTT酶促转化为紫色甲salt盐的生物化学比色MTT测定法用于评估HA和T98G细胞的生存力。简而言之，在96孔微量滴定板中接种培养基中的细胞（对于HA细胞系为3.5×103细胞/孔，对于T98G细胞系为3.0×103细胞/孔）。在第三天，将培养基更换为补充有不同浓度的凋亡抑制剂ABT-737或MIM-1的培养基，并继续培养另外两天。用凋亡抑制剂处理后，用Dulbeccos磷酸盐缓冲盐水（DPBS）冲洗细胞一次，并在补充有0.5mg / mL MTT的培养基中在潮湿的气氛中温育6小时。在随后在含有SDS [5％（w / v）]的培养基中温育16小时期间，沉淀的甲酸（其量与活细胞数成比例）被溶解。使用ELISA板读数器在540nm处测量含甲forma的溶液的吸光度。还测定未暴露于凋亡抑制剂的对照细胞的培养基的吸光度。相对于未处理的对照细胞计算细胞活力的百分比。在个体凋亡抑制剂处理后测定两种人脑细胞系的IC 50值。
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| 参考文献 |
[1]. Vidomanova E, et al. Microfluidic profiling of apoptosis-related genes after treatment with BH3-mimetic agents in astrocyte and glioblastoma cell lines. Oncol Rep. 2016 Dec;36(6):3188-3196.
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