| 描述 |
GDC-0575 dihydrochloride 是一种选择性的,可口服的 CHK1 抑制剂,IC50 值为 1.2 nM,具有抗肿瘤活性。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Chk1:1.2 nM (IC50)
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| 体外研究 |
GDC-0575二盐酸盐是一种选择性和口服生物可利用的CHK1抑制剂,IC50为1.2 nM。 GDC-0575(100nM)通过降低Tyr15-磷酸化CDK2的水平来抑制AraC诱导的CHK1活化。 GDC-0575(100nM)对AML细胞的活力没有影响,但与AraC组合显着降低细胞活力并诱导细胞凋亡。此外,GDC-0575加AraC对正常造血干细胞和祖细胞(HSPCs)没有影响[1]。 GDC-0575显示针对大多数测试的20种黑素瘤细胞系的细胞毒活性,但是作为肿瘤球(TS)生长的几种细胞系相对不敏感[2]。
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| 体内研究 |
GDC-0575(7.5mg/kg,口服)与AraC alomost组合完全消除了移植U937-Luc细胞的小鼠的白血病负担,并显示出比单独AraC更有效的活性。此外,GDC-0575提高了AraC在体内不同原发性AML模型中的细胞毒性[1]。 GDC-0575(25,50 mg/kg,po)剂量依赖性地抑制D20和C002异种移植物中肿瘤的生长[2]。
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| 细胞实验 |
对于共培养实验，在开始共培养前2天，将饲养细胞接种到I型胶原包被的96孔或6孔板上并使其达到汇合。在开始共培养前一天，将它们以6.8Gy照射并更换培养基。在共培养的第0天，使用相应的AmL培养基将AmL细胞以2×10 5个细胞/ mL铺板。将细胞在37℃下在5％CO 2湿润的培养箱中以指定的氧浓度培养。对于短期培养（STC），细胞在缺氧（5％O2）中与指定的药物保持1周：500nM AraC和/或100nM GDC-0575 [1]。
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| 动物实验 |
给小鼠[1] NSG小鼠静脉内注射1×105-106个AmL细胞和1-3×105个hCB CD34 + / hBM CD34 +细胞。通过FACS分析胫骨骨髓抽吸在9-11周证实AmL移植后，小鼠按照适当的7天治疗方案进行治疗，每日10mg / kg AraC经皮下注射，7.5mg / kg GDC-0575悬浮液通过每隔一天口服强饲法，和/或通过腹膜内注射每天施用300μg/ kg G-CSF，持续5天。最后一次给药后一周，小鼠因颈椎脱位而死亡。解剖股骨，胫骨和骨盆并用PBS冲洗。通过氯化铵裂解红细胞。细胞用人特异性FITC-缀合的抗-CD19，PE-缀合的抗-CD33，PE-Cy7-缀合的抗-CD45和PERCP-缀合的抗 - 鼠CD45抗体染色。通过DAPI染色排除死细胞和碎片。 BD LSR II流式细胞仪用于分析。使用FlowJo软件进行流式细胞术分析。收集了超过100,000个DAPI阴性事件。如果存在单个mCD45-hCD45 + CD33 + CD19-细胞群而没有伴随mCD45-hCD45 + CD33-CD19 +细胞，则据说存在AmL的植入[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Di Tullio A, et al. The combination of CHK1 inhibitor with G-CSF overrides cytarabine resistance in human acute myeloid leukemia. Nat Commun. 2017 Nov 22;8(1):1679. [2]. Oo ZY, et al. Endogenous Replication Stress Marks Melanomas Sensitive to CHEK1 Inhibitors In Vivo. Clin Cancer Res. 2018 Jun 15;24(12):2901-2912.
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