| 描述 |
BMS-935177是有效,选择性,可逆的布鲁顿酪氨酸激酶 (Btk) 抑制剂,IC50 值为3 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 3 nM (BTK)[1]
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| 体外研究 |
在通过BCR刺激的B细胞中,BMS-935177选择性地抑制几种不同的读数。 BMS-935177抑制人Ramos B细胞中的钙通量(IC50 = 27nM)并抑制用抗IgM和抗IgG刺激的外周B细胞中的CD69表面表达。然而,BMS-935177对通过CD40受体与CD40配体刺激的B细胞中的CD69表面表达没有影响。针对含有IgG的免疫复合物驱动的外周血单核细胞(PBMC)中的低亲和力激活Fcγ受体(FcγRIIa和FcγRIII)终点,BMS-935177有效抑制TNFα的产生,IC50值为14nM。 BMS-935177分别显示人和小鼠全血中的平均IC50值为550±100(n = 11)和2060±240nM(n = 3)[1]。
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| 体内研究 |
当每天以5,20和45mg/kg口服给予小鼠一次时,BMS-935177在第14天抑制IgG同种型的抗KLH抗体,在所有剂量下具有统计学显着的降低。在来自该研究的卫星小鼠中,以5mg/kg给药6,血浆浓度维持在小鼠全血BCR刺激的CD69 IC50值2μM以上仅约5小时。从初次免疫当天开始,每日口服10,20和30mg/kg,BMS-935177在该啮齿动物RA模型中提供了明显的剂量依赖性降低临床明显疾病的严重程度和发生率。与载体治疗相比,在10mg/kg BMS-935177时,疾病严重程度降低约40％,并且显示任何疾病迹象的动物的百分比减少了三分之一[1]。
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| 激酶实验 |
将BMS-935177以10mM溶于DMSO中并以11个浓度评估。向V-bottom 384孔板中加入BMS-935177，人重组BTK（1nM），荧光肽（1.5μM），ATP（20μM（Km app））和测定缓冲液（20mM HEPES，pH 7.4， 10mM MgCl 2,0.015％Brij 35表面活性剂和4mM DTT的1.6％DMSO溶液，终体积为30μL。在室温下孵育60分钟后，通过向每个样品中加入45μL35mMEDTA终止反应。通过电泳分离荧光底物和磷酸化产物（激发，488nm;发射，530nm）分析反应混合物[1]。
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| 动物实验 |
大鼠[1]雄性Sprague-Dawley大鼠（255-298g）用于PK研究。为了研究结晶微悬浮剂量后BMS-935177的口服生物利用度，大鼠通过口服强饲法（1,5和20mg / kg），T99.5％10mM柠檬酸盐缓冲液，pH4,0.02％DOSS接受BMS-935177， Methocel A4M。在给药后0.25,0.5,0.75,1,2,4,6,8和24小时口服给药后获得系列血液样品。通过在4℃（1500-2000g）下离心获得的血浆样品储存在-20℃直至分析[1]。小鼠[1]在小鼠抗胶原抗体诱导的关节炎（CAIA）炎症模型中研究BMS-935177（10和30mg / kg）对载体和地塞米松（Dex）的功效。用四种单克隆抗小鼠II型胶原抗体（各1mg）的混合物腹膜内（ip）注射小鼠。用载体（EtOH：TPGS：PEG300,5：5：90），BMS-935177（10或30mg / kg）或地塞米松（dex，1mg / kg）立即开始每日口服给药。三天后，用1.25mg / kg LPS腹膜内注射小鼠。此后，每周3小时监测小鼠的爪炎症的发展和严重程度[1]。
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| 参考文献 |
[1]. De Lucca GV, et al. Small Molecule Reversible Inhibitors of Bruton's Tyrosine Kinase (BTK): Structure-Activity Relationships Leading to the Identification of 7-(2-Hydroxypropan-2-yl)-4-[2-methyl-3-(4-oxo-3,4-dihydroquinazolin-3-yl)phenyl]-9H-carbazole-1-carboxamide (BMS-935177). J Med Chem. 2016 Sep 8;59(17):7915-35.
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