| 描述 |
MK-4074是乙酰辅酶A羧化酶 (acetyl-CoA carboxylase) 的肝特异性抑制剂,IC50 值约为3nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 3 nM (Acetyl-CoA Carboxylase)[1]
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| 体外研究 |
MK-4074强烈抑制ACC1和ACC2,IC50值约为3nM。 MK-4074具有高度肝脏特异性,因为它是仅存在于肝细胞中的有机阴离子转运蛋白(OATP)转运蛋白的底物,并且MK-4074从肝细胞向胆汁的排泄依赖于MRP2外排转运蛋白[1]。
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| 体内研究 |
在男性KKAy小鼠,肥胖,2型糖尿病和脂肪肝的小鼠模型中,单次口服剂量的MK-4074(0.3-3 mg/kg)以剂量依赖性方式显着降低DNL,ID50值为0.9施用后1小时mg/kg。在时间进程研究中,口服30mg/kg的MK-4074分别在给药后4,8和12小时使肝DNL降低83％,70％和51％。单次口服剂量的MK-4074(30和100 mg/kg)显着增加血浆总酮(肝脏FAO的替代生物标志物)1.5倍至3倍,最长达8小时[1]。
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| 激酶实验 |
通过螯合色谱法从表达重组ACC的FM3A或Sf9细胞或通过Softlink抗生物素蛋白树脂层析从肝脏中纯化重组ACC蛋白。将纯化的ACC蛋白与MK-4074一起在含有5mM ATP，250mM乙酰-CoA，4.1mM NaHCO 3,0.086mM NaH14CO3,20mM柠檬酸钾，20mM MgCl2,2mM DTT，0.5mg / mL BSA的测定缓冲液中孵育。 50 mM HEPES-Na（pH 7.5）在37°C下保持40分钟[1]。
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| 细胞实验 |
对于DNL和FAO的细胞测定，将细胞与MK-4074预孵育1小时。然后将细胞与65-260mM 14C-标记的乙酸盐或0.018mM 3H-标记的棕榈酸盐分别再孵育1-3小时，用于DNL或FAO测定。孵育后，分别提取细胞内14C标记的脂质和释放的3H标记的脂肪酸，并分别测量DNL和FAO [1]。
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| 动物实验 |
小鼠[1]研究在雄性KKAy小鼠或C57BL / 6J小鼠中进行。给KKAy小鼠喂食食物，同时在研究前给C57BL / 6J小鼠喂食高脂肪饮食（45％脂肪）3周。在施用MK-4074之前，用载体（蒸馏水，0.2mL /小鼠）处理小鼠7天，以使小鼠适应口服给药。在研究时动物是天真的药物。小鼠单独收纳。在肝切片研究之前，给予雄性KKAy小鼠（n = 10-11 /组）单次口服剂量的MK-4074（0.3至3mg / kg）。在测量肝脏DNL率之前，给予雄性KKAy小鼠（n = 5 /组）单次口服剂量的MK-4074（3至30mg / kg）。给雄性KKAy小鼠（n = 8 /组）施用单次口服剂量的MK-4074（10至100mg / kg），并在指定时间测量血浆酮体。将雄性C57BL / 6J小鼠（n = 5，veh; n = 10，MK-4074）喂食食物或高脂肪/高蔗糖（HF / HS）饮食7周，并且口服给予载体或MK-4074。 （10或30 mg / kg /天），研究前4周[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Kim CW, et al. Acetyl CoA Carboxylase Inhibition Reduces Hepatic Steatosis but Elevates Plasma Triglycerides in Mice and Humans: A Bedside to Bench Investigation. Cell Metab. 2017 Aug 1;26(2):394-406.e6.
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